Development and Validation of Stability-Indicating High-Performance Thin-Layer Chromatography for estimation of Ranolazine with Green Analytical Assessment

تُعد الأدوية مواد كيميائية معقدة يجب أن تظل مستقرة ونقية منذ لحظة تصنيعها وحتى وصولها إلى المريض. ولضمان ذلك، يعتمد العلماء على الكيمياء التحليلية، وهو مجال مخصص لتحديد وقياس الكمية الدقيقة للدواء في عينة ما. ويعد التحقق من كيفية سلوك الدواء عند تحلله جزءاً حيوياً من هذه العملية؛ فمع مرور الوقت، أو عند التعرض للحرارة أو الضوء أو بيئات كيميائية مختلفة، يمكن للدواء أن يتحلل إلى مواد أخرى. وقد تكون نواتج التحلل هذه غير ضارة، أو قد تكون ضارة، لذا من الضروري للباحثين امتلاك وسيلة لفصل الدواء الأصلي عن أجزائه المتحللة وقياسها بدقة. ويسمح هذا الفصل للمصنعين بالتأكد من أن القرص يحتوي على الجرعة الصحيحة وأنه لم تتكون أي شوائب خطيرة أثناء التخزين.

في دراسة حديثة، ركز الباحثون على دواء للقلب يسمى "رانولازين"، يُستخدم لعلاج آلام الصدر المزمنة. وبينما يُعرف هذا الدواء جيداً، كانت هناك حاجة لطريقة أبسط وأسرع وأكثر رفقاً بالبيئة لاختباره في شكل أقراص. طور الفريق طريقة جديدة باستخدام تقنية تسمى "كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة عالية الأداء". تخيل لوحة مسطحة تشبه الزجاج ومغطاة بمادة رملية ناعمة؛ يضع العلماء قطرة صغيرة من محلول الدواء على هذه اللوحة ويتركون مذيباً سائلاً يصعد عبر السطح. وبينما يتحرك السائل، فإنه يحمل الدواء معه. وتتحرك أجزاء مختلفة من خليط الدواء بسرعات متفاوتة، مما يؤدي إلى انفصالها إلى بقع متميزة. ومن خلال تسليط ضوء بلون محدد على هذه البقع، يمكن للباحثين قياس كمية الدواء الموجودة بدقة وتحديد أي شوائب تكونت.

بدأ الباحثون باختبار مخاليط سائلة متنوعة لإيجاد أفضل مزيج لتحريك الدواء للأعلى عبر اللوحة. وقد استقروا على مزيج من "التولوين" و"الميثانول"، الذي نجح في فصل "الرانولازين" إلى بقعة نظيفة ومتماسكة. وحددوا أن أفضل ضوء لرؤية هذه البقعة هو درجة معينة من الأشعة فوق البنفسجية، وهي غير مرئية للعين البشرية ولكن يمكن لأجهزتهم رصدها. وبمجرد ضبط الظروف، اختبروا مدى موثوقية الطريقة؛ حيث طبقوا الدواء بكميات تتراوح من كميات صغيرة جداً إلى كميات متوسطة إلى كبيرة، ووجدوا أن النت كانت متسقة تماماً، حيث شكلت خطاً مستقيماً عند رسمها بيانياً. وقد أثبت ذلك أن الطريقة يمكنها قياس الدواء بدقة سواء كانت العينة ضئيلة أو كبيرة.

ولضمان قوة هذه الطريقة، اختبرها العلماء تحت ظروف مختلفة قليلاً، مثل تغيير المزيج السائل بنسبة ضئيلة جداً أو تعديل الطول الموجي للضوق. وظلت النتائج مستقرة، مما أظهر أن الطريقة ستعمل بشكل موثوق حتى لو تغيرت بيئة المختبر قليلاً. كما تحققوا من مدى دقة القياسات من خلال تشغيل نفس العينة عدة مرات في اليوم نفسه وفي أيام مختلفة؛ ولم تختلف الأرقام إلا بجزء ضئيل من النسبة المئوية، مما أكد أن التقنية دقيقة للغاية. علاوة على ذلك، اختبروا قدرة الدواء على استعادة شكله الأصلي بعد خلطه بكميات معروفة من المادة النقية، ووجدوا أن الطريقة يمكنها اكتشاف جميع الدواء الموجود بدقة، حيث تراوحت معدلات الاستعادة حول تسعة وتسعين بالمائة.

وقد تضمن جزء كبير من الدراسة إجبار الدواء على التحلل لمعرفة ما إذا كانت الطريقة قادرة على رصد الشظايا الناتجة. عرض الباحثون الدواء لأحماض قوية، وقواعد قوية، وماء متعادل، وحرارة، وضوء. وفي كل حالة، تحلل الدواء جزئياً، مما أدى إلى إنشاء بقع كيميائية جديدة على اللوحة كانت منفصلة بوضوح عن الدواء الأصلي. فعلى سبيل المثال، عند التعرض لظروف متعادلة، تحلل الدواء بشكل ملحوست، لكن الطريقة لا تزال تميز بوضوح بين الدواء المتبقي وأجزاء التحلل الجديدة. وقد أكد هذا أن التقنية "محددة للاستقرار"، مما يعني أنها تستطيع التمييز بين الدواء السليم وأجزائه التالفة، وهو أمر ضروري لاختبارات السلامة.

وبعيداً عن النتائج الكيميائية، أولى الفريق اهتماماً كبيراً للأثر البيئي لعملهم. فغالباً ما تستخدم طرق الاختبار التقليدية كميات كبيرة من المواد الكيميائية السامة التي تخلق نفايات خطرة. وقد قيم الباحثون نهجهم الجديد باستخدام عدة أنظمة تسجيل حديثة مصممة لقياس مدى كون الإجراء المختبري "أخضر" أو صديقاً للبيئة. ووجدوا أن طريقتهم استخدمت كميات صغيرة جداً من السوائل وأنتجت حداً أدنى من النفايات. ورغم أن المذيبات المستخدمة لا تزال عضوية وتتطلب تعاملاً حذراً، إلا أن العملية الإجمالية كانت أقل ضرراً بالبيئة بكثير من العديد من التقنيات القديمة. وخلصت الدراسة إلى أن هذا النهج الجديد ليس دقيقاً وسريعاً فحسب، بل هو أيضاً خيار مسؤول لمستقبل الاختبارات الدوائية، حيث يوفر وسيلة لضمان جودة الدواء دون إثقال كاهل الكوكب بالنفايات الكيميائية المفرطة.