🔬 condensed matter

Behaviour of the model antibody fluid constrained by rigid spherical obstacles: effects of the obstacle-antibody binding

यह शोध पत्र एक सैद्धांतिक ढांचे का उपयोग करता है जो वर्टहाइम के थर्मोडायनामिक पर्टरबेशन सिद्धांत, फ्लोरी-स्टॉकमेयर सिद्धांत और स्केल्ड पार्टिकल सिद्धांत को कंप्यूटर सिमुलेशन द्वारा मान्य करता है, ताकि यह जांचा जा सके कि कैसे एक सरंध्र माध्यम (पोरस मीडियम) में Y-आकार के एंटीबॉडी मॉडलों और कठोर गोलाकार बाधाओं के बीच आकर्षक अंतःक्रियाएं जटिल चरण व्यवहारों की ओर ले जाती हैं, जिसमें री-एंट्रेंट फेज सेपरेशन और क्लोज्ड-लूप कोएक्ज़िस्टेंस क्षेत्र शामिल हैं।

मूल लेखक: Yu. V. Kalyuzhnyi, T. Patsahan

प्रकाशित 2026-03-26

📖 6 मिनट में पढ़ें🧠 गहराई से पढ़ें

CC BY 4.0

मूल लेखक: Yu. V. Kalyuzhnyi, T. Patsahan

मूल पेपर CC BY 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/) के तहत लाइसेंस किया गया है। ✨ नीचे दिए गए पेपर की यह व्याख्या AI से तैयार की गई है। इसे लेखकों ने न तो लिखा है, न इसका समर्थन किया है। तकनीकी सटीकता के लिए मूल पेपर देखें। पूरा डिस्क्लेमर पढ़ें

मुख्य चित्र: एक भीड़भाड़ वाले, चिपचिपे कमरे में एंटीबॉडीज

एक विशाल कमरे के भीतर चल रही एक भीड़भाड़ वाली पार्टी की कल्पना करें। मेहमान एंटीबॉडीज (शरीर की प्रतिरक्षा प्रणाली के सैनिक) हैं। आमतौर पर, वैज्ञानिक अध्ययन करते हैं कि ये एंटीबॉडीज एक खुले, खाली कमरे में कैसे व्यवहार करती हैं। लेकिन वास्तविक जीवन में, आपके शरीर के भीतर, वे अन्य प्रोटीन, डीएनए और सेल संरचनाओं से भरे एक छोटे, अव्यवस्थित स्थान में दबी होती हैं। इसे "मैक्रोमोलेक्यूलर क्राउडिंग" (macromolecular crowding) कहा जाता है।

यह शोध पत्र एक विशिष्ट प्रश्न पूछता है: क्या होगा यदि कमरे की दीवारें चिपचिपी टेप से ढकी हों?

शोधकर्ताओं ने इसका अनुकरण करने के लिए एक कंप्यूटर मॉडल बनाया। वे यह देखना चाहते थे कि एंटीबॉडीज आपस में कैसे क्रिया करती हैं बनाम वे "चिपचिपी दीवारों" (बाधाओं) के साथ कैसे क्रिया करती हैं।

पात्रों का परिचय

एंटीबॉडीज (Y-आकार के नर्तक):
कल्पive कि एंटीबॉडीज Y-आकार के नर्तक हैं। प्रत्येक नर्तक 7 छोटे गोलों से बना है जो आपस में जुड़े हुए हैं। "Y" के सिरों पर (हाथों पर), उनके पास विशेष चिपचिपे पैच होते हैं।

Y-आकार क्यों? क्योंकि वास्तविक एंटीबॉडीज वैसी ही दिखती हैं।
चिपचिपे हाथ क्यों? क्योंकि एंटीबॉडीज चीजों को पकड़ने (जैसे वायरस) के लिए बनाई गई हैं।

बाधाएं (विशाल पीले गोले):
कमरा बड़े, स्थिर पीले गोलों से भरा है (जो अन्य कोशिकीय संरचनाओं का प्रतिनिधित्व करते हैं)। इन गोलों पर भी अपने स्वयं के चिपचिपे पैच लगे हुए हैं।

ट्विस्ट: पिछले अध्ययनों में, ये पीले गोले केवल चिकने और कठोर (जैसे बॉलिंग बॉल) थे। इस अध्ययन में, वे चिपचिपे (जैसे वेल्क्रो) हैं।

परस्पर क्रिया (नृत्य):
एंटीबॉडीज दो चीजें कर सकती हैं:

एक-दूसरे का हाथ थामना (एंटीबॉडी-एंटीबॉडी बॉन्डिंग)।
पीले गोलों का हाथ थामना (एंटीबॉडी-बाधा बॉन्डिंग)।

प्रयोग: म्यूजिकल चेयर्स का खेल

शोधकर्ताओं ने यह देखने के लिए कंप्यूटर सिमुलेशन चलाए कि जब वे तापमान और पीले गोलों के "चिपचिपेपन" को बदलते हैं तो क्या होता है। उन्होंने अपने गणितीय अनुमानों (Wertheim's TPT और Flory-Stockmayer जैसे जटिल सिद्धांतों का उपयोग करके) की तुलना वास्तविक कंप्यूटर सिमुलेशन (जैसे लाखों बार चलने वाला एक वीडियो गेम) से की।

यहाँ उन्हें क्या मिला, जिसे तीन परिदृश्यों में विभाजित किया गया है:

1. "चिकनी दीवार" परिदृश्य (कोई चिपचिली बाधा नहीं)

यदि पीले गोले चिकने हैं (कोई चिपचिपा पैच नहीं), तो एंटीबॉडीज ठंडे होने पर आपस में जुड़कर एक तरल बनाती हैं। यह सामान्य व्यवहार है, जैसे पानी जम कर बर्फ बन जाता है।

2. "चिपचिपी दीवार" परिदृश्य (आश्चर्य)

जब पीले गोलों में चिपचिपे पैच होते हैं, तो चीजें अजीब हो जाती हैं। एंटीबॉडीज के पास एक विकल्प होता है: क्या मैं अपने साथी एंटीबॉडी का हाथ थामूँ, या दीवार का हाथ थामूँ?

यह प्रतिस्पर्धा एक री-एंट्रेंट फेज सेपरेशन (Re-entrant Phase Separation) पैदा करती है। यह एक फैंसी तरीका है यह कहने का कि जैसे-जैसे तापमान कम होता है, सिस्टम "साथ में → अलग → साथ में" के चक्र से गुजरता है।

चरण 1 (गर्म): एंटीबॉडीज खुश हैं। वे एक-दूसरे का हाथ थामते हैं और एक विशाल, जुड़ी हुई जाल (एक तरल) बनाते हैं।
चरण 2 (ठंडा होते समय): अचानक, एंटीबॉडीज चिपचिपी दीवारों से विचलित हो जाती हैं। वे पीले गोलों को पकड़ने के लिए एक-दूसरे का हाथ छोड़ देती हैं। विशाल जाल टूट जाता है, और एंटीबॉडीज अलग-थलग होकर व्यक्तिगत रूप से तैरने लगती हैं। "तरल" गायब हो जाता है, और सिस्टम एक एकल गैस जैसी अवस्था बन जाता है।
चरण 3 (बहुत ठंडा): पीले गोले भर जाते हैं। वे और अधिक एंटीबॉडी नहीं पकड़ सकते क्योंकि उनके सभी चिपचिपे पैच इस्तेमाल हो चुके हैं। एंटीबॉडीज को दीवारों को छोड़ने और फिर से एक-दूसरे का हाथ थामने के लिए मजबूर होना पड़ता है। विशाल जाल फिर से बनता है, और तरल वापस आ जाता है।

उपमा: एक डांस फ्लोर की कल्पना करें।

पहले, हर कोई एक पार्टनर के साथ नाच रहा है (तरल/Liquid)।
फिर, डीजे एक दीवार पर मुफ्त स्नैक्स रख देता है। हर कोई नाचना बंद कर देता है और स्नैक्स खाने के लिए दौड़ पड़ता है (गैस/अलग-थलग)।
अंत में, स्नैक्स खत्म हो जाते हैं। हर कोई वापस डांस फ्लोर पर जाने और पार्टनर्स के साथ नाचने के लिए मजबूर हो जाता है (तरल/Liquid)।

"क्लोज्ड लूप" (बंद लूप)

इस खोज का सबसे रोमांचक हिस्सा इसके परिणामों का आकार है। यदि आप तापमान बनाम घनत्व (Temperature vs. Density) का ग्राफ खींचते हैं, तो वह क्षेत्र जहाँ एंटीबॉडीज एक साथ आती हैं, एक बंद लूप (एक अंडाकार या डोनट के आकार) जैसा दिखता है।

लूप के अंदर: एंटीबॉडीज अलग-अलग होती हैं (तरल बनाम गैस)।
लूप के बाहर: वे आपस में मिली हुई होती हैं।

इसका मतलब है कि एक विशिष्ट तापमान सीमा है जहाँ एंटीबॉडीज अलग होने से मना कर देती हैं, भले ही वे आमतौर पर ऐसा करती हैं। यह "री-एंट्रेंट" व्यवहार दुर्लभ और जटिल है।

यह क्यों मायने रखता है?

चिकित्सा: एंटीबॉडीज का उपयोग कई आधुनिक दवाओं में किया जाता है। यदि हम एक केंद्रित एंटीबॉडी समाधान (concentrated antibody solution) बना रहे हैं, तो हमें यह जानने की आवश्यकता है कि क्या यह गुच्छेदार होकर जाम (clog) हो जाएगा या सुचारू रहेगा। यह शोध पत्र हमें बताता है कि यदि दवा को एक भीड़भाड़ वाले और चिपचिपे वातावरण में रखा जाता है, तो यह अप्रत्याशित व्यवहार कर सकती है।
जीव विज्ञान: यह हमें समझने में मदद करता है कि वास्तविक कोशिका के भीतर प्रोटीन कैसे व्यवहार करते हैं, जो एक साफ टेस्ट ट्यूब नहीं, बल्कि एक अस्त-व्यस्त, भीड़भाड़ वाली और चिपचिपी जगह है।
विधि: लेखकों ने सिद्ध किया कि उनके जटिल गणितीय सूत्र कंप्यूटर सिमुलेशन के साथ बहुत अच्छी तरह मेल खाते हैं। इसका मतलब है कि वैज्ञानिक हर बार महंगे कंप्यूटर सिमुलेशन चलाने के बजाय इन सूत्रों का उपयोग यह अनुमान लगाने के लिए कर सकते हैं कि अन्य प्रोटीन कैसे व्यवहार करेंगे।

सारांश

यह शोध पत्र भीड़भाड़ वाले, चिपचिपे कमरे में एंटीबॉडीज द्वारा "कैच" खेलने के बारे में है। शोधकर्ताओं ने पाया कि यदि कमरे की दीवारें चिपचिपी हैं, तो एंटीबॉडीज अपने स्वयं के नेटवर्क को तोड़ने के लिए एक-दूसरे को छोड़ने और दीवारों से चिपकने के लिए तैयार हो जाएंगी। लेकिन यदि दीवारें बहुत भर जाती हैं, तो उन्हें फिर से एक-दूसरे से जुड़ने के लिए मजबूर होना पड़ता है। यह व्यवहार का एक अजीब, लूपिंग पैटर्न बनाता है जो वैज्ञानिकों को बेहतर दवाएं डिजाइन करने और यह समझने में मदद कर सकता है कि कोशिका के भीतर जीवन कैसे काम करता है।

1. समस्या विवरण (Problem Statement)

यह अध्ययन एक भीड़भाड़ वाले, विषम जैविक वातावरण के भीतर सीमित मोनोक्लोनल एंटीबॉडीज (mAbs) के ऊष्मप्रवैगिकी (thermodynamic) और अवस्था व्यवहार (phase behavior) की जांच करता है। जबकि मैक्रोमोलेक्यूलर क्राउडिंगिंग के "कठोर" प्रभावों (excluded volume) का व्यापक अध्ययन किया जा चुका है, प्रोटीन और उनके आसपास के मैट्रिक्स के बीच विशिष्ट आकर्षक अंतःक्रियाओं से उत्पन्न "कोमल" (soft) प्रभावों को कम समझा गया है।

विशेष रूप से, यह कार्य निम्नलिखित के बीच जटिल परस्पर क्रिया को संबोधित करता है:

एंटीबॉडी-एंटीबॉडी अंतःक्रिया: एंटीबॉडीज के स्व-जुड़ाव (self-association) की प्रवृत्ति।
एंटीबॉडी-मैट्रिक्स अंतःक्रिया: स्थिर बाधाओं (जो कोशिकीय क्राउडर का प्रतिनिधित्व करती हैं) के साथ एंटीबॉडी का बंधन, जिनमें आकर्षक "चिपचिपे" पैच होते हैं।
ज्यामितीय बाधाएं (Geometric Constraints): एक यादृच्छिक छिद्रपूर्ण माध्यम के भीतर गैर-गोलाकार, लचीले Y-आकार के एंटीबॉडी अणुओं का संकुचन।

केंद्रीय प्रश्न यह है कि कैसे रिपल्सिव (repulsive) या कमजोर आकर्षक बाधाओं वाले सिस्टम की तुलना में, एंटीबॉडी और मैट्रिक्स बाधाओं के बीच मजबूत, अल्प-दूरी का बंधन, फेज सेपरेशन (phase separation), परकोलेशन (percolation) और एकत्रीकरण (aggregation) को बदल देता है।

2. कार्यप्रणाली (Methodology)

लेखक विश्लेषणात्मक सिद्धांत और कंप्यूटर सिमुलेशन को संयोजित करने वाला एक बहुआयामी दृष्टिकोण अपनाते हैं।

A. मॉडल (The Model)

एंटीबॉडीज: इन्हें सात स्पर्शरेखीय रूप से बंधे हार्ड स्फेयर्स (एक केंद्रीय बीड और दो-दो बीड्स वाली तीन भुजाओं) से बने Y-आकार के कणों के रूप में मॉडल किया गया है। तीनों टर्मिनल बीड्स में ऑफ-सेंटर स्क्वायर-वेल आकर्षक पैच होते हैं।
मैट्रिक्स (बाधाएं): इन्हें बड़े व्यास ( $\sigma_0 = 3\sigma_1$ ) वाले यादृच्छिक रूप से वितरित, स्थिर हार्ड स्फेयर्स के रूप में मॉडल किया गया है। ये "पैची" (patchy) हैं, जिसका अर्थ है कि इनमें एंटीबॉडी पैच के साथ बंधने में सक्षम विशिष्ट संख्या ( $n_0$ ) में आकर्षक स्थल होते हैं।
अंतःक्रियाएं (Interactions):
- रिपल्सिव (Repulsive): हार्ड-स्फीयर क्षमता।
- आकर्षक (Attractive): पैच-पैच अंतःक्रियाओं (एंटीबॉडी-एंटीबॉडी और एंटीबॉडी-बाधा दोनों) के लिए ऑफ-सेंटर स्क्वायर-वेल क्षमता।

B. सैद्धांतिक ढांचा (Theoretical Framework)

सैद्धांतिक विवरण तीन उन्नत सांख्यिकीय यांत्रिकी सिद्धांतों को एकीकृत करता है:

वर्टम का थर्मोडायनामिक पर्टर्बेशन थ्योरी (TPT): बॉन्डिंग के कारण होने वाले संबद्ध (associating) स्वभाव को संभालने के लिए, विशेष रूप से हेल्महोल्ट्ज़ फ्री एनर्जी योगदान की गणना करने के लिए उपयोग किया जाता है।
फ्लोरी-स्टॉकमेयर थ्योरी (FST): मैट्रिक्स की उपस्थिति में परकोलेशन थ्रेशोल्ड और बॉन्ड निर्माण की संभावना की गणना करने के लिए विस्तारित किया गया है।
स्केल्ड पार्टिकल थ्योरी (SPT): संदर्भ प्रणाली (गैर-संबद्ध हार्ड स्फेयर्स) के लिए लागू किया गया है ताकि संकुचन और बहिष्कृत आयतन (excluded volume) के प्रभावों को ध्यान में रखा जा सके।

सिद्धांत बॉन्डेड कणों के अंश ( $X_i$ ) के लिए समाधान निकालता है और ऊष्मप्रवैगिकी गुणों (रासायनिक क्षमता, दबाव) को प्राप्त करने के लिए उपयोग करता है ताकि अवस्था साम्य (phase equilibria) निर्धारित किया जा सके।

C. कंप्यूटर सिमुलेशन (Computer Simulations)

विधि: LAMMPS में $NVT$ एन्सेम्बल में मॉलिक्यूलर डायनेमिक्स (MD) सिमुलेशन।
पोटेंशियल स्मूथिंग (Potential Smoothing): MD को सक्षम करने के लिए, विच्छिन्न (discontinuous) हार्ड-स्फीयर और स्क्वायर-वेल पोटेंशियल को निरंतर एनालॉग्स: स्यूडो-हार्ड-स्फीयर (PHS) और कंटीन्यूअस स्क्वायर-वेल (CSW) पोटेंशियल से बदल दिया गया।
प्रोटोकॉल:
- बाधाओं को फ्रीज (quenched) किया गया।
- एंटीबॉडीज को एनील्ड (annealed) किया गया।
- सिमुलेशन कम किए गए तापमान $T^* = 0.085$ और $0.1$ पर चलाए गए।
- बॉन्डिंग अंशों के सैद्धांतिक भविष्यवाणियों की तुलना सिमुलेशन डेटा के साथ करके सत्यापन किया गया।

3. प्रमुख योगदान (Key Contributions)

नूतन मॉडल आर्किटेक्चर: अध्ययन स्पष्ट रूप से एंटीबॉडी की Y-आकृति और लचीलेपन को मॉडल करता है, जो सरल गोलाकार कोलाइड्स से आगे बढ़कर वास्तविक प्रोटीन ज्यामिति का बेहतर प्रतिनिधित्व करता है।
स्ट्रॉन्ग बाइंडिंग रिजीम: पिछले अध्ययनों के विपरीत जो कमजोर आकर्षण पर ध्यान केंद्रित करते हैं, यह कार्य मजबूत बंधन (strong binding) की जांच करता है, जो विशिष्ट जैविक अंतःक्रियाओं के लिए प्रासंगिक है।
एकीकृत सैद्धांतिक ढांचा: TPT, FST और SPT का सफल संयोजन प्रतिस्पर्धी अंतःक्रियाओं की उपस्थिति में संबद्ध तरल पदार्थों के व्यवहार की भविष्यवाणी करने के लिए एक मजबूत विश्लेषणात्मक उपकरण प्रदान करता है।
री-एंट्रेंट फेज व्यवहार की खोज: शोध पत्र एक जटिल फेज डायग्राम की पहचान करता है जिसमें एक "क्लोज्ड-लूप" सह-अस्तित्व क्षेत्र (coexistence region) शामिल है, जो एंटीबॉडी-एंटीबॉडी स्व-जुड़ाव और मैट्रिक्स बाइंडिंग के बीच प्रतिस्पर्धा से प्रेरित होता है।

4. मुख्य परिणाम (Key Results)

A. सिद्धांत का सत्यापन (Validation of Theory)

$i$ -बार बॉन्डेड अणुओं के अंशों ( $x_i$ ) के लिए सैद्धांतिक भविष्यवाणियां MD सिमुलेशन के साथ अच्छे मात्रात्मक समझौते को दर्शाती हैं, विशेष रूप से उच्च तापमान ( $T^* = 0.1$ ) पर।
कम तापमान ( $T^* = 0.085$ ) और उच्च घनत्व पर विसंगतियां दिखाई देती हैं, जहाँ सिद्धांत कम पैच काउंट ( $n_0=0, 1$ ) के लिए बॉन्डिंग को थोड़ा अधिक आंकता है और उच्च पैच काउंट ( $n_0=3$ ) के लिए इसे कम आंकता है।

B. बॉन्डिंग डायनेमिक्स (Bonding Dynamics)

प्रतिस्पर्धा प्रभाव (Competition Effect): जैसे-जैसे घनत्व बढ़ता है, एंटीबॉडी-एंटीबॉडी बॉन्ड बनाने और एंटीबॉडी-बाधा बॉन्ड बनाने के बीच प्रतिस्पर्धा होती है।
नेटवर्क निर्माण: कम घनत्व पर, एंटीबॉडी मुख्य रूप से मैट्रिक्स से बंधते हैं। जैसे-जैसे घनत्व बढ़ता है, पैची बाधाओं की उपस्थिति में फ्लूइड-फ्लुइड नेटवर्क का निर्माण विलंबित हो जाता है।
तापमान निर्भरता: उच्च तापमान पर पैची मैट्रिक्स का बॉन्डिंग अंशों पर प्रभाव कमजोर होता है लेकिन तापमान घटने के साथ यह स्पष्ट हो जाता है।

C. फेज व्यवहार और री-एंट्रेंस (Phase Behavior and Re-entrance)

सबसे महत्वपूर्ण निष्कर्ष एंटीबॉडी-बाधा अंतःक्रिया की शक्ति ( $\epsilon_{01}^*$ ) द्वारा संचालित री-एंट्रेंट फेज सेपरेशन का उदय है:

मध्यम अंतःक्रिया शक्ति ( $n_0=0$ ): सिस्टम एक मानक लिक्विड-गैस फेज डायग्राम प्रदर्शित करता है जिसमें एक एकल क्रिटिकल पॉइंट होता है।
मध्यवर्ती अंतःक्रिया शक्ति: फेज डायग्राम तीन क्रिटिकल पॉइंट्स में विभाजित हो जाता है।
- उच्च तापमान: एक क्लोज्ड-लूप सह-अस्तित्व क्षेत्र (ऊपरी और निचले क्रिटिकल पॉइंट्स) दिखाई देता है। यहाँ फेज सेपरेशन एंटीबॉडी-एंटीबॉडी बॉन्ड्स के एक परकोलेटिंग नेटवर्क के निर्माण से प्रेरित होता है।
- मध्यवर्ती तापमान: सिस्टम एक एक-चरण क्षेत्र (one-phase region) में पुनः प्रवेश करता है। मजबूत एंटीबॉडी-बाधा बंधन, फ्लूइड-फ्लuid नेटवर्क को बाधित करता है, जिससे फेज सेपरेशन दब जाता है।
- निम्न तापमान: सिस्टम दूसरे फेज सेपरेशन (पारंपरिक लिक्विड-गैस) से गुजरता है। इन तापमानों पर, मैट्रिक्स पैच संतृप्त (saturated) हो जाते हैं, जिससे एंटीबॉडी मुक्त होकर पुनः फ्लूइड-फ्लुइड नेटवर्क बनाने के लिए उपलब्ध हो जाते हैं।
उच्च अंतःक्रिया शक्ति: जैसे-जैसे $\epsilon_{01}^*$ एक सीमा ( $\approx 0.93$ ) से ऊपर बढ़ता है, क्लोज्ड-लूप क्षेत्र सिकुड़ जाता है और गायब हो जाता है, जिससे केवल निम्न-तापमान फेज सेपरेशन बचता है।

5. महत्व (Significance)

जैविक प्रासंगिकता: निष्कर्ष बताते हैं कि भीड़भाड़ वाले कोशिकीय वातावरण में विशिष्ट आकर्षक अंतःक्रियाएं कैसे गैर-मोनोटोनिक (non-monotonic) फेज व्यवहार की ओर ले जा सकती हैं। यह प्रोटीन एकत्रीकरण, बायोमॉलिक्यूलर कंडेनसेट्स के निर्माण और चिकित्सीय एंटीबॉडी फॉर्मूलेशन की स्थिरता को समझने के लिए महत्वपूर्ण है।
मैकेनिस्टिक अंतर्दृष्टि: अध्ययन प्रदर्शित करता है कि वातावरण के साथ "कोमल" आकर्षक अंतःक्रियाएं एक स्विच के रूप में कार्य कर सकती हैं, जो तापमान और अंतःक्रिया शक्ति के आधार पर फेज सेपरेशन को बढ़ावा दे सकती हैं या उसे दबा सकती हैं।
मेथोडोलॉजिकल प्रगति: मान्य सैद्धांतिक ढांचा विषम मीडिया में जटिल संबद्ध तरल पदार्थों के लिए प्रयोगों को डिजाइन करने और डेटा की व्याख्या करने के लिए एक भविष्य कहनेवाला उपकरण प्रदान करता है, जो एंटीबॉडीज से लेकर अन्य मैक्रोमोलेक्यूलर सिस्टम तक विस्तृत है।

निष्कर्षतः, यह शोध स्थापित करता है कि स्व-जुड़ाव और मैट्रिक्स बाइंडिंग के बीच की परस्पर क्रिया एक समृद्ध फेज परिदृश्य बनाती है, जिसमें री-एंट्रेंट व्यवहार शामिल है, जो संकुचन में जैविक तरल पदार्थों के जटिल भौतिकी को मॉडल करने के लिए आवश्यक है।