Evaluation of immunomagnetic separation coupled with culture and molecular methods for the detection and recovery of Shigella spp. in ready-to-eat salads
本研究表明，免疫磁珠分离结合培养与分子方法技术能有效检测并回收高污染即食沙拉中的志贺氏菌属（*Shigella* spp.），且在 100 CFU/g 浓度下的成功率显著高于 10 CFU/g，并在一个未接种样本中发现了显著的自然发生现象。
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每天都有数百万人食用无需烹饪、无需清洗且无需进一步准备的沙拉。这些即食食品虽然方便，但其安全性完全取决于可能隐藏在叶片中的微观世界中的细菌。在这些危险的微观入侵者中，有一类被称为志贺氏菌（Shigella）的细菌，它们会导致严重的腹泻，并能通过受污染的食物快速传播。由于这些沙拉是生食的，其中的任何细菌都不会被热量杀死，因此检测出此类病原体是一项至关重要的任务。科学家面临的挑战在于，这些蔬菜是复杂的环境，往往充满了无害的细菌，这些细菌可以掩盖危险的细菌，就像试图在一堆其他针头中寻找一根特定的针一样。为了解决这个问题，研究人员开发了将目标细菌从混合物中提取出来的工具，但目前尚不清楚当食物中已经充满其他生命时，哪种方法效果最好。
委内瑞拉的一个科学家团队致力于测试一种专门用于在这些复杂的沙拉环境中寻找志贺氏菌的特定技术组合。他们专注于一种称为免疫磁性分离的方法，该方法使用涂有抗体（一种旨在只抓取志贺氏菌的特化钩状蛋白质）的微小磁珠。一旦细菌被这些磁珠捕捉，就可以用磁铁将它们从其余的沙拉混合物中拉出来，从而使它们浓缩，以便更容易检测。研究人员想看看这种“磁性钩子”在与两种不同的用于在磁性步骤之前帮助细菌生长的液体浴配合使用时，是否效果更好，以及在通过培养细菌或使用读取其遗传密码的分子测试来观察细菌时，是否更有效。
为了进行这项测试，该团队从当地超市购买了45包商业即食沙拉。他们通过取部分沙拉并特意加入已知数量的志贺氏菌来创建一个受控实验，创建了两组：一组含有极低量的细菌，另一组含有较高量的细菌。他们还保留了一些完全不添加细菌的沙拉部分，以观察该方法能否发现天然污染。科学家将这些样本分为两组进行第一步处理。一半被放入一种旨在让所有细菌生长的温和、非选择性液体培养基中，而另一半则进入了一种不同的、更严苛的培养基中，旨在阻止许多非目标细菌的生长。在让细菌在这些液体中生长后，研究人员应用磁珠来捕获志贺氏菌。
一旦磁珠完成了它们的工作，团队便将结果分为两部分进行确认细菌存在的方法测试。在第一种方法中，他们将捕获的细菌涂布在特殊的琼脂平板上，观察它们是否会生长成可识别的可见菌落。在第二种方法中，他们将捕获的物质通过分子测试进行处理，该测试寻找志贺氏菌的特定遗传特征，而不需要先培养细菌。这使得他们能够比较传统培养法与更快速的现代分子法之间的成功率，并观察最初使用的液体培养基是否会产生影响。
结果显示，最初使用的液体培养基类型并不会显著改变结果。无论科学家使用的是温和的培养基还是严苛的培养基，发现细菌的能力在统计学上都是相似的。然而，他们开始时的细菌量却产生了巨大的差异。当沙拉样本中含有较高浓度的细菌时，无论使用培养平板还是分子测试，磁性方法都能更成功地发现它们。当初始量非常低时，该方法在许多情况下难以检测到细菌。这表明，虽然磁珠是一个强大的工具，但它们仍然依赖于有足够的靶标细菌存在才能有效地捕捉它们。
在一次现实应用测试中，研究人员将他们表现最好的方法应用于那45包未经人工污染的原始沙拉包。测试成功地在其中一包沙拉中发现了志贺氏菌，这一发现证实了这些细菌确实可能存在于商业即食沙拉中。这次单次的检测（代表了样本中虽小但真实的比例）凸显了拥有灵敏工具以在病原体到达消费者之前将其拦截的重要性。研究结论认为，将磁性分离与分子测试相结合，提供了比传统方法更快速的筛选这些危险细菌的方法，尽管该技术仍需改进，才能在细菌数量极少时变得可靠。这项工作证明，虽然磁性钩子是清理复杂沙拉环境的一个有前景的工具，但其成功在很大程度上取决于实际有多少细菌可以被捕捉到。
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