Time-Dependent Evaluation of Genotoxic Effects Following CBCT Exposure in Pediatric Patients Using Buccal Micronucleus Assay

Resumen Técnico: Evaluación dependiente del tiempo de los efectos genotóxicos tras la exposición a CBCT en pacientes pediátricos mediante el ensayo de micronúcleos bucales

Planteamiento del problema
La tomografía computarizada de haz cónico (CBCT) se ha convertido en una herramienta diagnóstica indispensable en la odontología y ortodoncia pediátrica debido a su capacidad para proporcionar imágenes tridimensionales con una menor exposición a la radiación en comparación con la TC convencional. Sin embargo, los pacientes pediátricos poseen células de división rápida y una mayor esperanza de vida, lo que los hace más radiosensibles y vulnerables a efectos estocásticos como las modificaciones del ADN y la capacidad carcinogénica. Aunque las dosis de CBCT son menores que las de la TC médica, siguen siendo significativamente superiores a las de la radiografía convencional y panorámica. Si bien los efectos genotóxicos de la radiación están bien documentados, existe una literatura insuficiente sobre la persistencia o recuperación de estos efectos a lo largo del tiempo en poblaciones pediátricas. La mayoría de los estudios existentes evalúan los cambios citogenéticos solo dentro de intervalos cortos (7–14 días) post-exposición, dejando un vacío en la comprensión del patrón temporal del daño al ADN y de si las modificaciones celulares inducidas por la radiación son momentáneas o constantes.

Metodología
Este estudio experimental in vivo evaluó a 25 niños sistémicamente sanos (de 6 a 12 años de edad) que requerían escaneos de CBCT por razones diagnósticas u ortodóncicas. El estudio se adhirió a la Declaración de Helsinki y recibió la aprobación ética de la Dra. D. Y. Patil Dental College and Hospital.

• Protocolo de imagen: Los escaneos se realizaron utilizando un sistema Planmeca ProMax 3D Plus (120 kVp, 14 mAs, exposición de 25–30 segundos, tamaño de vóxel de 150 µm, campo de visión [FOV] de 30 × 20 cm).
• Recolección de muestras: Se recolectaron células de la mucosa bucal exfoliadas utilizando una espátula de madera en tres puntos temporales específicos:
  1. Inmediatamente antes de la exposición a CBCT (Línea base).
  2. 15 días después de la exposición.
  3. 30 días después de la exposición.
• Análisis: Las muestras se extendieron en portaobjetos de vidrio, se tiñeron con la tinción de Papanicolaou y se examinaron bajo un microscopio óptico a 40x de aumento. Un observador ciego cuantificó la frecuencia de micronúcleos (MN) basándose en los criterios de Sarto et al. (1987).
• Análisis estadístico: Los datos fueron analizados mediante ANOVA de medidas repetidas, prueba post hoc de Tukey y la prueba U de Mann–Whitney, y análisis de correlación de Pearson, estableciendo un nivel de significancia de P < 0.05.

Resultos clave
El estudio demostró una variación dependiente del tiempo estadísticamente significativa en la frecuencia de micronúcleos (P = 0.000):

• Línea base: La frecuencia media de MN fue de 2.92 ± 1.706.
• 15 días post-exposición: La frecuencia aumentó significativamente a 5.16 ± 1.993. El análisis post hoc confirmó una diferencia significativa entre la línea base y los 15 días (P = 0.001).
• 30 días post-exposición: La frecuencia disminuyó a 4.04 ± 2.051. Aunque esto representó una reducción respecto al pico de los 15 días, la diferencia entre la línea base y los 30 días, así como entre los 15 y 30 días, no fue estadísticamente significativa (P = 0.105).

No se observaron diferencias estadísticamente significativas basadas en el género (P = 0.61), y el análisis de correlación de Pearson no reveló una asociación significativa entre la edad y la frecuencia de micronúcleos en ningún intervalo de tiempo.

Contribuciones y afirmaciones clave
La contribución principal de esta investigación es la evaluación de la progresión temporal de los efectos genotóxicos en las células de la mucosa bucal pediátrica tras la exposición a CBCT. El artículo afirma que:

1. Genotoxicidad transitoria: La exposición a CBCT induce un aumento temporal en la frecuencia de micronúcleos, alcanzando su pico a los 15 días post-exposición.
2. Recuperación parcial: A los 30 días, se observa una reducción en la frecuencia de micronúcleos, lo que sugiere el inicio de los mecanismos de reparación del ADN y la renovación de las células epiteliales dañadas. Sin embargo, los valores no regresaron completamente a los niveles de la línea base dentro de la ventana de observación de 30 días.
3. Utilidad del biomarcador: El estudio refuerza la utilidad del ensayo de micronúcleos bucales como un método sensible, no invasivo y fiable para monitorear el daño cromosómico inducido por la radiación en los tejidos directamente expuestos.

Significancia y limitaciones
Los autores sostienen que, si bien ocurre una recuperación parcial, el aumento observado en los marcadores genotóxicos subraya la necesidad de adherirse estrictamente a los principios de protección radiológica (ALARA y ALADA) y de prescribir el CBCT de manera juiciosa en pacientes pediátricos.

El artículo reconoce modestamente sus limitaciones, incluyendo un tamaño de muestra relativamente pequeño (N=25), la evaluación únicamente de la frecuencia de micronúcleos sin evaluar otras anomalías nucleares (por ejemplo, picnosis, cariorrexis) y la falta de correlación entre las dosis de radiación efectiva específicas y los hallazgos genotóxicos. En consecuencia, los autores recomiendan realizar más estudios a largo plazo con muestras más grandes y múltiples biomarcadores para comprender plenamente los efectos secundarios de la exposición a CBCT en niños.