Evaluation of Anti-diarrheal Activity of 80 % Methanol Crude Root Extract and Solvent Fractions of Ficus Thonningii B.( Moraceae) in Swiss Albino Mice

Resumo Técnico: Avaliação da Atividade Antidiarreica do Extrato Bruto de Raiz de Metanol 80% e Frações de Solventes de Ficus thonningii B. (Moraceae) em Camundongos Swiss Albino

Problema
A diarreia continua sendo uma das principais causas de mortalidade infantil globalmente, particularmente em regiões de baixa renda como o Subsolo da África, onde contribui significativamente para as mortes infantis na Etiópia. Embora a medicina tradicional na Etiópia utilize extensivamente as raízes de Ficus thonningii para o tratamento da diarreia, a validação científica desta prática etnomedicinal é limitada. Além disso, os agentes farmacológicos convencionais para a diarreia, como a loperamida e a racecadotril, estão associados a efeitos adversos, incluindo constipação, obstrução intestinal e complicações do sistema nervoso central. Este estudo aborda a necessidade de validar cientificamente o potencial antidiarreico das raízes de Ficus thonningii e identificar alternativas mais seguras e eficazes, avaliando a atividade de seu extrato bruto de metanol e de suas frações de solventes.

Metodologia
O estudo empregou um design experimental in vivo abrangente utilizando camundongos Swiss albino (20–30 g).

• Material Vegetal: As raízes de Ficus thonningii foram coletadas em Dirmara kebele, Etiópia, autenticadas e processadas em um extrato bruto de metanol 80%.
• Fracionamento: O extrato bruto foi particionado em frações de n-hexano, acetato de etila e aquosa.
• Triagem Fitoquímica: Testes qualitativos padrão foram conduzidos para identificar metabólitos secundários (alcaloides, taninos, flavonoides, etc.) no extrato bruto e nas frações.
• Perfil de Segurança: A toxicidade oral aguda foi avaliada na dose de 2000 mg/kg em fêmeas de camundongo, observando-se por 14 dias.
• Modelos Experimentais: A atividade antidiarreica foi avaliada usando quatro modelos distintos:
  1. Diarreia Induzida por Óleo de Rícino: Mediu-se o tempo de início, frequência de fezes e produção de fezes úmidas.
  2. Enteropooling Induzido por Óleo de Rícino: Avaliou-se o acúmulo de fluido intestinal (volume e peso).
  3. Trânsito Gastrointestinal Normal: Mediu-se a propulsão de uma refeição de carvão para avaliar a motilidade normal.
  4. Motilidade Gastrointestinal Induzida por Óleo de Rícino: Avaliou-se o tempo de trânsito sob condições diarreicas.
• Controles e Dosagem: Os grupos incluíram controle negativo (veículo), controle positivo (loperamida 3 mg/kg para diarreia/enteropooling; sulfato de atropina 5 mg/kg para motilidade) e grupos de teste recebendo extrato bruto ou frações nas doses de 100, 200 e 400 mg/kg.
• Análise Estatística: Os dados foram analisados por meio de ANOVA de uma via seguido pelo teste post hoc de Tukey, com significância estabelecida em p < 0,05. Um Índice Antidiarreico (ADI) in vivo foi calculado para integrar múltiplos parâmetros.

Principais Resultados

• Fitoquímica: O extrato bruto continha alcaloides, antraquinonas, saponinas, taninos, fenóis, terpenoides e flavonoides. Esteroides e glicosídeos estavam ausentes. A fração aquosa testou negativa para alcaloides, mas reteve outros constituintes ativos.
• Segurança: O extrato demonstrou uma alta margem de segurança, com nenhuma mortalidade ou sinais tóxicos observados a 2000 mg/kg.
• Eficácia Antidiarreica:
  • Extrato Bruto: Retardou significativamente o início da diarreia e reduziu a frequência e o peso das fezes de maneira dose-dependente. A 400 mg/kg, alcançou 64,70% de inibição da diarreia, superando o fármaco padrão loperamida (71,76% de inibição da frequência de defecação, embora o texto note as taxas de inibição específicas do extrato bruto).
  • Frações de Solventes: A fração aquosa exibiu a atividade mais potente. A 400 mg/kg, reduziu a produção de fezes úmidas em 31,6% e a produção total de fezes em 35%, superando a loperamida (21% e 21,43%, respectivamente). A fração de acetato de etila mostrou atividade moderada, enquanto a fração de n-hexano foi a menos eficaz.
• Mecanismos de Ação:
  • Enteropooling: Tanto o extrato bruto quanto as frações reduziram significativamente o volume e o peso do fluido intestinal, indicando um mecanismo antissecretor. A fração aquosa a 400 mg/kg alcançou 72,7% de inibição do volume de fluido.
  • Motilidade: Os extratos inibiram significativamente o trânsito gastrointestinal. O extrato bruto a 400 mg/kg inibiu o trânsito da refeição de carvão em 65,7%, excedendo a inibição do sulfato de atropina (57%). A fração aquosa também mostrou forte atividade antimotilidade (54,86% de inibição a 400 mg/kg).
• Índice Antidiarreico (ADI): A fração aquosa a 400 mg/kg rendeu o maior ADI (90,8%), ligeiramente excedendo o da loperamida (89,23%).

Significância e Alegações
Os autores afirmam que o estudo fornece evidência farmacológica apoiando o uso tradicional das raízes de Ficus thonningii para o manejo da diarreia. Os achados sugerem que a eficácia da planta é mediada por um mecanismo duplo:

1. Ação Antissecretora: Redução do acúmulo de fluido intestinal, provavelmente através da inibição da síntese de prostaglandinas e do aumento da absorção de fluidos/eletrólitos.
2. Ação Antimotilidade: Lentidão da propulsão intestinal, potencialmente via inibição de autocoides, prostaglandinas e influxo de cálcio.

O artigo conclui que a fração aquosa contém os compostos bioativos mais potentes (provavelmente constituintes polares como taninos, flavonoides e saponinas) e oferece uma alternativa promissora aos fármacos convencionais devido à sua alta eficácia e perfil de segurança. Os autores enfatizam que estes resultados validam o uso etnomedicinal da planta e estabelecem uma base para pesquisas futuras voltadas ao isolamento de compostos bioativos específicos e ao desenvolvimento de formulações padronizadas. O estudo abstém-se modestamente de reivindicar aplicação clínica imediata, em vez disso, chamando para a necessidade de mapeamento químico (chemical fingerprinting), isolamento de compostos e novos ensaios toxicológicos e clínicos.