Blood characteristics and histomorphology of parenchymatous organs in rabbits feeding hempseed cake

Resumo Técnico: Características Sanguíneas e Histomorfologia de Órgãos Parenquimatosos em Coelhos Alimentados com Torta de Semente de Cânhamo

Definição do Problema
Os subprodutos da cânhamo industrial (Cannabis sativa L.), especificamente a torta de semente de cânhamo (um resíduo da extração de óleo), representam um potencial coproduto agroindustrial para a nutrição animal devido ao seu rico conteúdo de ácidos graxos essenciais, proteínas, minerais e compostos bioativos. Embora estudos anteriores tenham indicado que a torta de semente de cânhamo não impacta negativamente o ganho de peso corporal ou a qualidade espermática em coelhos machos, há uma necessidade de avaliar de forma abrangente sua segurança a longo prazo em relação à saúde sistêmica. Especificamente, o potencial para toxicidade orgânica subclínica, distúrbios hematológicos ou alterações histopatológicas em órgãos parenquimatosos vitais (fígado, rins e testículos) requer investigação detalhada para garantir a segurança da incorporação deste aditivo alimentar nas dietas de coelhos.

Metodologia
O estudo utilizou coelhos machos clinicamente saudáveis da linhagem New Zealand White, divididos em três grupos (n=10 por grupo):

• Grupo Controle (C): Alimentado com uma mistura de ração completa padrão.
• Grupo Experimental E5: Alimentado com uma dieta suplementada com 5% de torta de semente de cânhamo por 100 kg de ração.
• Grupo Experimental E10: Alimentado com uma dieta suplementada com 10% de torta de semente de cânhamo por 100 kg de ração.

O ensaio de alimentação durou quatro meses. Ao final do experimento, os animais foram eutanasiados para a coleta de sangue e órgãos parenquimatosos (fígado, rim e testículo).

• Análise Bioquímica e Hematológica: As amostras de sangue foram analisadas para um painel abrangente de parâmetros. A hematologia incluiu contagens de glóbulos brancos (WBC, LYM, MON, NEU), índices de glóbulos vermelhos (RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC) e parâmetros plaquetários (PLT, PCT, MPV, PDW). A bioquímica avaliou perfis minerais (K, Cl, Ca, P, Mg), enzimas hepáticas (ALP, ALT, AST), marcadores de função renal (Creatinina, Ácido Úrico) e indicadores metabólicos (Glicose, Colesterol, Triglicerídeos, Proteína Total, Bilirrubina).
• Análise Histomorfológica: As amostras de tecido foram fixadas em formalina neutra a 10%, desidratadas e incluídas em Technovit 7100. As secções (5 AU) foram coradas com fucsina básica e azul de toluidina e examinadas sob microscópio óptico para avaliar a morfologia celular, vacuolização e distribuição de tecido conjuntivo.
• Análise Estatística: Os dados foram avaliados utilizando ANOVA de uma via, sendo p-valores < 0,05 considerados estatisticamente significativos.

Principais Resultados

• Parâmetros Bioquímicos:
  • A maioria dos parâmetros, incluindo enzimas hepáticas (ALP, ALT, AST), bilirrubina, glicose, proteínas totais, triglicerídeos e perfis minerais, permaneceu dentro das faixas de referência e não apresentou diferenças significativas entre os grupos. Isso indica ausência de hepatotoxicidade ou disfunção metabólica grave.
  • Colesterol: O grupo E5 exibiu uma diminuição estatisticamente significativa no colesterol sérico (0,43 mM.l⁻¹) em comparação ao controle (0,97 mM.l⁻¹). O grupo E10 apresentou níveis mais próximos ao controle (0,63 mM.l⁻¹).
  • Creatinina: Ambos os grupos experimentais mostraram uma diminuição estatisticamente significativa na creatinina sérica em comparação ao controle (E5: 56,21 µM.l⁻¹; E10: 41,61 µM.l⁻¹ vs. Controle: 80,18 µM.l⁻¹).
• Parâmetros Hematológicos:
  • As contagens de glóbulos brancos, linfócitos, monócitos, neutrófilos e índices de glóbulos vermelhos permaneceram estáveis em todos os grupos, indicando ausência de ativação imune ou anemia.
  • Plaquetas: O grupo E5 mostrou uma diminuição estatisticamente significativa na contagem de plaquetas (PLT) e no plaquetocrito (PCT) em comparação tanto ao grupo controle quanto ao grupo E10. O nível de plaquetas do grupo E10 foi comparável ao do controle, sugerindo uma potencial adaptação dependente da dose.
• Achados Histomorfológicos:
  • Fígado: Os grupos experimentais exibiram aumento na acumulação de vacúolos nos hepatócitos, indicativo de infiltração gordurosa em estágio inicial (esteatose). Isso foi mais pronunciado no grupo E10. No entanto, os núcleos dos hepatócitos permaneceram normais e não foram observadas alterações distróficas.
  • Rins: Foram observados glomérulos renais atróficos esporádicos nos grupos experimentais, comparáveis ao controle. A vacuolização tubular estava presente, mas não foi significativamente diferente entre os grupos.
  • Testículos: O grupo E10 mostrou um aumento evidente no tecido conjuntivo intersticial entre os túbulos seminíferos em comparação ao controle. Crucialmente, a espermiogênese não foi interrompida e a intensidade da ocorrência de células de Leydig permaneceu comparável ao controle.

Significância e Alegações
Os autores concluem que a alimentação de torta de semente de cânhamo em concentrações de 5% e 10% para coelhos machos não induz sinais clínicos graves de disfunção orgânica, distúrbios hematológicos ou desequilíbrios bioquímicos.

• Perfil de Segurança: A estabilidade das enzimas hepáticas e a manutenção da maioria dos parâmetros dentro das faixas de referência excluem hepatotoxicidade aguda ou toxicidade sistêmica nas concentrações testadas.
• Respostas Adaptativas: As diferenças estatísticas observadas — especificamente a diminuição da creatinina, a redução transitória de plaquetas na dose de 5% e a flutuação do colesterol — são interpretadas não como falhas patológicas, mas como respostas fisiológicas adaptativas às mudanças dietéticas. A normalização das contagens de plaquetas no grupo de 10% sugere que o organismo se adapta a doses mais elevadas.
• Nuance Histológica: Embora alterações histológicas menores tenham sido observadas (aumento da vacuolização hepática, atrofia renal esporádica e aumento do tecido intersticial testicular), estas foram descritas como regressivas ou não distróficas. Os autores enfatizam que estas alterações não progrediram para condições patológicas nem prejudicaram a função orgânica (por exemplo, a espermatogênese permaneceu intacta).

O estudo apoia a recomendação de uso de torta de semente de cânhamo em níveis de inclusão de até 10% na nutrição de coelhos, observando que as alterações histopatológicas observadas requerem investigação adicional para elucidar totalmente os mecanismos subjacentes, mas não impedem atualmente o uso seguro do aditivo alimentar.