Analytical Quality by Design (AQbD)-Based Development and Validation of a Robust RP-HPLC Method for Quantification of Regorafenib in Bulk Drug and Tablet Dosage Form

No mundo da medicina, a diferença entre uma cura e um fracasso reside frequentemente nos detalhes de como um medicamento é fabricado e medido. Antes que um comprimido chegue ao paciente, os cientistas devem provar que cada única tablete contém a quantidade exata de medicamento que afirma conter, nem mais, nem menos. Isto não é apenas uma questão de contagem; trata-se de garantir que o composto químico no interior seja puro, estável e capaz de desempenhar o seu papel no corpo humano. Para alcançar isto, os investigadores utilizam ferramentas sofisticadas para separar e identificar moléculas, tal como um bibliotecário a classificar uma enorme pilha de livros para encontrar um título específico. Uma dessas ferramentas é uma técnica chamada cromatografia líquida de alta eficiência, que empurra uma mistura líquida através de uma coluna especial para separar os seus ingredientes com base na forma como interagem com o material no interior. Durante anos, os cientistas confiaram num método tradicional de ajuste destas máquinas, alterando uma configuração de cada vez para ver o que acontecia. No entanto, este método é frequentemente lento e pode perder a forma como diferentes configurações podem trabalhar em conjunto para afetar o resultado final. Uma abordagem mais recente e sistemática chamada Qualidade Analítica por Design surgiu, tratando o desenvolvimento destes testes com o mesmo planeamento cuidadoso utilizado para construir uma ponte, garantindo que o método seja robusto e fiável antes de ser colocado em uso.

Num estudo recente, uma equipa de investigadores da Índia aplicou este pensamento moderno e sistemático ao desenvolvimento de um teste para o regorafenib, um poderoso fármaco utilizado para tratar o cancro hepático avançado, o cancro colorretal e certos tumores gástricos. O regorafenib é uma molécula complexa que funciona bloqueando várias vias que os tumores utilizam para crescer e espalhar-se, mas como é difícil de dissolver em água e existe em quantidades minúsculas dentro de um comprimido, medi-lo com precisão é um desafio significativo. Os investigadores propuseram-se criar uma nova forma altamente fiável de medir este fármaco, tanto na sua forma de pó bruto como nos comprimidos acabados que os pacientes tomam. Em vez de adivinhar e testar uma variável de cada vez, eles mapearam todo o cenário do experimento, identificando quais as configurações que mais importavam e como influenciavam o resultado. Focaram-se em dois fatores principais: a mistura de líquidos usados para transportar o fármaco através da máquina e a velocidade com que esse líquido flui. Ao testarem estes fatores em conjunto, através de uma grelha estruturada de experiências, puderam ver não apenas como cada um funcionava isoladamente, mas também como interagiam entre si, permitindo-lhes encontrar a combinação perfeita que funcionaria sempre, mesmo se as condições mudassem ligeiramente.

A equipa utilizou um programa informático para desenhar nove experiências específicas, executando-as com diferentes rácios de líquido e diferentes velocidades de fluxo. Observaram atentamente para ver como o fármaco aparecia no ecrã da máquina, procurando um pico nítido e claro que indicasse uma separação limpa de outras substâncias. Descobriram que a velocidade do fluxo do líquido e o equilíbrio exato da mistura líquida eram os fatores mais críticos. Quando ajustavam estas configurações, podiam ver a forma do pico do fármaco mudar, tornando-se mais nítido e simétrico ou ligeiramente distorcido. Através deste processo, identificaram uma "zona segura", ou espaço de design, onde o método teria um desempenho perfeito. A configuração ideal descoberta utilizou uma mistura de 75 por cento de acetonitrilo e 25 por cento de água, fluindo a uma taxa de 1,5 mililitros por minuto. Sob estas condições, o fármaco percorreu a coluna e foi detetado em pouco menos de quatro minutos, aparecendo como um pico limpo e simétrico que era fácil de medir. Isto representou uma melhoria significativa em relação aos métodos antigos, que muitas vezes exigiam mais tentativas e erros e não garantiam o mesmo nível de consistência.

Uma vez encontrado este setup ideal, os investigadores submeteram o método a uma série rigorosa de verificações para provar que estava pronto para o uso no mundo real. Testaram se a máquina conseguia detetar o fármaco em quantidades muito pequenas, descobrindo que podia medir de forma fiável concentrações tão baixas quanto 0,25 microgramas por mililitro. Verificaram se os resultados eram consistentes executando a mesma amostra várias vezes, e os números foram quase idênticos em todas as vezes, com uma variação inferior a um por cento. Também testaram a precisão do método adicionando quantidades conhecidas do fármaco à mistura e observando se a máquina as encontrava, recuperando entre 98 e 100 por cento do que foi adicionado. Para garantir que o método era suficientemente resistente para lidar com as pequenas e inevitáveis mudanças que ocorrem num laboratório movimentado, eles alteraram deliberadamente as configurações, como mudar o comprimento de onda de deteção por apenas um nanómetro, e descobriram que os resultados permaneciam estáveis. Finalmente, aplicaram o seu novo método a um comprimido comercial de regorafenib, e o teste confirmou que a pílula continha 99,43 por cento da quantidade rotulada, dentro do intervalo aceitável para segurança e eficácia.

Este estudo demonstra que, ao utilizar uma abordagem estruturada e baseada na ciência para desenvolver métodos analíticos, os cientistas farmacêuticos podem criar testes que são não só precisos, mas também resilientes. O novo método para medir o regorafenib é robusto o suficiente para ser usado no controlo de qualidade de rotina, garantindo que cada lote de medicação cumpre os mais elevados padrões de segurança. Ao afastarem-se da antiga forma de alterar uma coisa de cada vez e abraçarem uma estratégia que considera o sistema como um todo, os investigadores forneceram uma ferramenta fiável para a indústria farmacêutica. Isto garante que os pacientes que recebem este tratamento crítico para o cancro possam confiar que o medicamento que tomam é exatamente o que deveria ser, até à última molécula.