Dose-Dependent Effects of Aloe vera Gel Extract Powder on Quality, Antioxidant Status and Fertility of Liquid-Stored Boar Semen

Resumo Técnico: Efeitos Dose-Dependentes do Pó de Extrato de Gel de Aloe vera em Sêmen de Cachaço Armazenado Líquido

Definição do Problema
A inseminação artificial (IA) utilizando sêmen de cachaço armazenado líquido é uma tecnologia crítica para melhorar a produtividade na suinocultura, particularmente em sistemas de pequenos produtores no Nordeste da Índia. No entanto, a eficácia desta técnica é comprometida pelo declínio progressivo da qualidade espermática durante o armazenamento líquido a 16°C. Esta deterioração é impulsionada principalmente pelo estresse oxidativo causado pelo acúmulo de espécies reativas de oxigênio (ERO). Devido à alta concentração de ácidos graxos poliinsaturados nas membranas plasmáticas dos espermatozoides de suínos e a um sistema de defesa antioxidante intrínseco limitado, os espermatozoides são altamente suscetíveis à peroxidação lipídica, danos à membrana e fragmentação do DNA. Embora existam antioxidantes sintéticos, há um interesse crescente em antioxidantes naturais derivados de plantas, como a Aloe vera (A. vera), que possuem propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes documentadas. Embora a A. vera tenha sido explorada como crioprotetor em outras espécies e como pó de folha seca em sêmen de cachaço, sua eficácia específica como pó de extrato de gel em extensores de sêmen de cachaço armazenados líquidos permanece amplamente não avaliada.

Metodologia
O estudo utilizou um delineamento de amostra dividida envolvendo ejaculados agrupados de seis cachaços adultos saudáveis (raças Rani Crossbred e Large Black) com motilidade inicial ≥70%. O sêmen foi diluído com um extensor padrão de Glicose-EDTA-Penicilina-Estreptomicina (GEPS) servindo como controle, ou com GEPS suplementado com concentrações graduadas de pó de extrato de gel de A. vera (5, 10 e 20 µg/mL).

As amostras foram armazenadas em um incubador BOD a 16°C por até 96 horas. O estudo avaliou diversos parâmetros em 0, 72 e 96 horas:

• Qualidade Espermática: Motilidade progressiva (método de filme úmido), vitalidade (coloração eosin-nigrosina), integridade da membrana plasmática (Teste de Inchaço Espermático Hipoosmótico) e a porcentagem de espermatozoides vivos com acrossomos intactos (coloração de Giemsa).
• Status Oxidativo: Capacidade Antioxidante Total (T-AOC) e níveis de Malondialdeído (MDA) para avaliar a peroxidação lipídica.
• Integridade do DNA: Avaliada via citometria de fluxo baseada em TUNEL para detectar fragmentação de DNA.

Com base nos resultados in vitro, um ensaio de fertilidade in vivo foi conduzido utilizando 40 porcas em estro. Elas foram divididas em dois grupos: um inseminado com sêmen GEPS controle e outro com sêmen GEPS suplementado com a concentração ideal de A. vera (20 µg/mL). As doses de sêmen foram armazenadas por 3 dias antes da IA. As méticas de fertilidade registradas foram taxa de concepção (não retorno ao estro dentro de 21 dias), taxa de parto e tamanho da leitegada.

Principais Resultados

• Qualidade Espermática: A suplementação com 20 µg/mL de A. vera melhorou significativamente (P < 0,05) a motilidade, vitalidade, integridade da membrana plasmática e a porcentagem de espermatozoides vivos com acrossomos intactos (LIA) em comparação ao controle e às concentrações menores (5 e 10 µg/mL) em 72 e 96 horas. Especificamente, o grupo de 20 µg/mL manteve 80,25% de espermatozoides vivos e 71,25% de LIA após 96 horas de armazenamento.
• Status Antioxidante: A concentração de 20 µg/mL aumentou significativamente a Capacidade Antioxidante Total (T-AOC) e reduziu significativamente os níveis de MDA (indicando redução da peroxidação lipídica) em 72 horas em comparação ao controle.
• Integridade do DNA: Embora o grupo de 20 µg/mL tenha exibido a menor porcentagem de fragmentação de DNA (1,11%) e a maior porcentagem de DNA intacto (98,91%), as diferenças entre os grupos de tratamento e o controle não foram estatisticamente significativas (P > 0,05).
• Fertilidade In Vivo: O ensaio de fertilidade mostrou uma tendência de melhoria no grupo A. vera. A taxa de concepção aumentou de 60% no grupo controle para 75% no grupo suplementado, e a taxa de parto seguiu um padrão semelhante. No entanto, o tamanho médio da leitegada (8,16 vs. 8,27) não apresentou diferença estatisticamente significativa entre os grupos.

Significância e Alegações
Os autores concluem que a suplementação de extensores GEPS com 20 µg/mL de pó de extrato de gel de A. vera é a dose mais eficaz para preservar a qualidade e a integridade funcional do sêmen de cachaço armazenado líquido a 16°C. O estudo demonstra que a A. vera atua como um potente antioxidante natural, mitigando eficazmente o estresse oxidativo, aumentando a capacidade antioxidante total e reduzindo a peroxidação lipídica durante o armazenamento.

Em relação à fertilidade, o artigo alega que as melhorias observadas na concepção e nas taxas de parto são promissoras, mas preliminares. Os autores afirmam explicitamente que, embora os resultados in vivo se alinhem aos parâmetros de qualidade espermática melhorados (motilidade, integridade da membrana), a falta de significância estatística nos resultados de fertilidade exige cautela. Eles asseveram que novos estudos envolvendo amostras maiores, múltiplos machos e ensaios controlados são necessários para estabelecer definitivamente se as melhorias in vitro se traduzem em aumentos estatisticamente significativos no desempenho reprodutivo. O artigo posiciona a A. vera como uma alternativa natural viável para mitigar o dano oxidativo em extensores de sêmen de cachaço, contribuindo para a otimização das práticas de IA em sistemas de pequena escala de suinocultura.