Development of an In Vitro Denture Stomatitis Model Simulating Candida albicans Biofilm Formation and Detachment Under Daily Antiseptic Immersion
इस अध्ययन ने मानक ऐक्रेलिक रेजिन का उपयोग करके एक पुनरुत्पादनीय इन विट्रो मॉडल विकसित किया ताकि यह प्रदर्शित किया जा सके कि 0.5% सोडियम हाइपोक्लोराइट या 0.12% क्लोरहेक्सिडिन ग्लुकोनेट में दैनिक इमर्शन (डुबाना), जल नियंत्रण की तुलना में कैंडिडा एल्बिकन्स बायोफिल्म लोड को महत्वपूर्ण रूप से कम करता है, जो नैदानिक अनुप्रयोग से पूर्व डेंटर-क्लींजिंग एजेंटों के मूल्यांकन के लिए एक मान्य ढांचा प्रदान करता है।
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अपने मुँह की कल्पना एक हलचल भरे, सूक्ष्म शहर के रूप में करें। इस शहर के भीतर, कठोर प्लास्टिक से बनी छोटी इमारतें हैं जिन्हें डेंचर (dentures) कहा जाता है। कभी-कभी, अदृश्य किराएदार जिन्हें Candida albicans (एक प्रकार का कवक/फंगस) कहा जाता है, यहाँ रहने का निर्णय लेते हैं। शुरुआत में, वे केवल विनम्र मेहमान होते हैं, लेकिन यदि वे बिना सफाई के बहुत लंबे समय तक रुकते हैं, तो वे एक जंगली पार्टी आयोजित करते हैं। वे एक चिपचिपा, मजबूत किला बनाते हैं जिसे "बायोफिल्म" (biofilm) कहा जाता है जो डेंचर की सतह से चिपक जाता है। यह किला इतना मजबूत है कि सामान्य कुल्ला करने से इसे धोया नहीं जा सकता है, और यह नीचे की कोमल त्वचा (म्यूकोसा) को परेशान कर सकता है, जिससे डेंचर स्टोमेटाइटिस (denture stomatitis) नामक दर्दनाक लाल चकत्ते हो सकते हैं। वैज्ञानिकों और दंत चिकित्सकों के लिए बड़ा सवाल यह है: हम रोगी को नुकसान पहुँचाए बिना इस चिपचिपे किले को कैसे तोड़ सकते हैं? इसका उत्तर देने के लिए, शोधकर्ताओं को वास्तविक लोगों पर प्रयोग करने से पहले एक नियंत्रित सेटिंग में, जैसे कि एक लघु प्रयोगशाला शहर में, सफाई उत्पादों का परीक्षण करने के लिए एक तरीके की आवश्यकता है।
नारेसुआन विश्वविद्यालय, थायलैंड के शोधकर्ताओं द्वारा किए गए इस अध्ययन ने बिल्कुल ऐसा ही एक लघु प्रयोगशाला शहर बनाया। वे यह देखना चाहते थे कि दो सामान्य सफाई एजेंट—0.5% सोडियम हाइपोक्लोराइट (एक प्रकार का ब्लीच) और 0.12% क्लोरहेक्सिडिन ग्लूकोनेट (एक सामान्य माउथवॉश सामग्री)—डेंचर के प्लास्टिक के टुकड़े पर Candida albicans की पार्टी को कितनी अच्छी तरह से खत्म कर सकते हैं। अपने परीक्षण को निष्पक्ष और यथार्थवादी बनाने के लिए, उन्होंने सख्त अंतरराष्ट्रीय नियमों (ISO 20795:2013) का पालन किया ताकि हीट-पॉलीमराइज्ड एक्रिलिक रेजिन के चिकने, 10x10x3 मिमी³ ब्लॉक बनाए जा सकें, जिन्हें कांच की गोली की तरह चिकना (खुरदरापन 0.2 µm से कम) पॉलिश किया गया था, ताकि फंगस केवल सतह ऊबड़-खाबड़ होने के कारण अपनी पकड़ न बना सके।
शोधकर्ताओं ने 10 दिनों का एक प्रयोग स्थापित किया जिसमें उन्होंने इन प्लास्टिक ब्लॉकों पर अलग-अलग समय के लिए फंगस को बढ़ने दिया: 24 घंटे, 48 घंटे, या 72 घंटे। ये समय सीमाएं फंगस के अभी पहुँचना शुरू करने, सहज होने और एक परिपक्व, मजबूत किला बनाने का प्रतिनिधित्व करती थीं। एक बार जब "पार्टियां" बन गईं, तो उन्होंने ब्लॉकों को प्रतिदिन ब्लीच, माउथवॉश, या केवल सादे डीआयोनाइज्ड पानी (एक नियंत्रण समूह के रूप में) के साथ उपचारित किया। यह देखने के लिए कि कितने फंगस कोशिकाएं बची हैं, उन्होंने एक विशेष सोनिक बाथ (एक मशीन जो 35,000 Hz पर ध्वनि तरंगों का उपयोग करती है) का उपयोग किया ताकि फंगस को प्लास्टिक से झटक कर हटाया जा सके, और फिर जीवित कोशिकाओं की संख्या गिनने के लिए एक रासायनिक परीक्षण जिसका नाम MTS assay है, का उपयोग किया।
परिणामों ने दिखाया कि दोनों सफाई एजेंट सादे पानी की तुलना में जीवित फंगस कोशिकाओं को कम करने में बहुत बेहतर थे। जब फंगस केवल 24 या 48 घंटों के लिए वहां मौजूद था, तो उपचारों के कारण जीवित बचे लोगों की संख्या में महत्वपूर्ण गिरावट आई। डेटा ने एक स्पष्ट पैटर्न का सुझाव दिया: आप डेंचर को इन एजेंटों के साथ उपचारित करने के जितने लंबे समय तक रखते हैं, फंगस की जीवित कोशिकाएं उतनी ही कम रह जाती हैं। कहानी 72 घंटे वाले समूह के साथ थोड़ी जटिल हो गई। जब फंगस को एक पूर्ण 72 घंटों के लिए अपना किला बनाने दिया गया था, तो सफाई एजेंटों और सादे पानी के बीच का अंतर सांख्यिकीय रूप से उतना स्पष्ट नहीं था, हालांकि पानी वाले समूह में अंत तक आश्चर्यजनक रूप से कम भार था।
शोधकर्ताओं ने बिंदुओं को जोड़ने के लिए गणित का उपयोग किया, यह पाते हुए कि फंगस को उपचार से पहले बढ़ने के लिए दिया गया समय, सफाई एजेंट का प्रकार और उपचार के दिनों की संख्या, सभी जीवित बची फंगस कोशिकाओं से जुड़े हुए थे। उन्होंने पाया कि 24-घंटे और 48-घंटे वाले समूहों के लिए, सफाई एजेंट पानी की तुलना में काफी बेहतर काम करते थे। अध्ययन सुझाव देता है कि यह नया, मानकीकृत तरीका—चिकने प्लास्टिक ब्लॉकों और 10-दिवसीय समय सीमा का उपयोग करना—दंत चिकित्सकों के लिए एक विश्वसनीय उपकरण हो सकता है ताकि वे रोगियों को सिफारिश करने से पहले यह पता लगा सकें कि कौन से सफाई उत्पाद सबसे अच्छा काम करते हैं। हालांकि इस अध्ययन में विभिन्न कीटाणुओं के मिश्रण का परीक्षण नहीं किया गया (इसने केवल Candida albicans का उपयोग किया), इसने इन चिपचिपे फंगल किलों को तोड़ने को समझने में मदद करने के लिए एक दोहराने योग्य मॉडल सफलतापूर्वक बनाया।
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