Clinical Observation of CD7-Directed CAR-T cell Therapy in Relapsed/Refractory Mixed Phenotype Acute Leukaemia

技术摘要：CD7 定向 CAR-T 细胞治疗复发/难治性混合表型急性白血病（MPAL）的临床观察

问题陈述
混合表型急性白血病（MPAL）是一种罕见且具有异质性的恶性肿瘤，其特征是表达来自髓系和淋巴系细胞的谱系相关抗原。目前，MPAL 缺乏针对性的嵌合抗原受体（CAR）T 细胞疗法靶点，导致复发/难治性（R/R）疾病患者缺乏有效的治疗选择。虽然 CD19 和 CD22 定向的 CAR-T 疗法在 B 细胞急性淋巴细胞白血病（ALL）中取得了成功，且 CD7 定向的 CAR-T 疗法在 T 细胞 ALL 中显示出高效能，但关于 CD7 定向疗法用于 MPAL 的系统性数据仍存在显著空白。鉴于 CD7 在部分 MPAL 患者的白血病细胞中表达，本研究旨在评估人源化 CD7 定向 CAR-T（hCD7 CAR-T）细胞作为 R/R MPAL 挽救治疗方案的安全性和有效性，以应对迫切的临床需求。

方法学
这是一项在首都医科大学附属北京广济博仁医院进行的单中心、回顾性研究，涉及 7 例在 2024 年 4 月至 2025 年 12 月期间接受治疗的 R/R MPAL 患者。

• 患者筛选： 入选标准要求通过流式细胞术测定，白血病细胞上的 CD7 表达率 >80%。所有患者既往均经多种疗法治疗失败，包括化疗、靶向药物，部分患者甚至曾接受过 CAR-T 治疗或异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）。
• 治疗药物： 使用编码 CD3ζ 信号域和 4-1BB 共刺激域的慢病毒载体构建第二代人源化 CD7 CAR。
• 治疗方案： 患者在输注前接受氟化尿苷和/或环磷酰胺进行淋巴细胞清除。hCD7 CAR-T 细胞培养 5–8 天后，按 1.0 至 9.0 × 10⁵/kg 的剂量进行输注。
• 输注后管理： 未进行移植物抗宿主病（GVHD）预防治疗。对患者进行细胞因子释放综合征（CRS）、免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）及感染情况的监测。
• 评估： 通过骨髓形态学、通过流式细胞术和定量 PCR 进行的微小残留病（MRD）评估以及影像学检查（针对髓外病灶）在第 30 天进行疗效评估。所有达到缓解的患者均在输注后 5–8 周进行桥接异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）。随访期延长至 2026 年 4 月 30 日。

关键结果

• 安全性： 该疗法表现出良好的安全性特征。主要的副作用是 1 级细胞因子释放综合征（CRS），在所有患者中均有发生，但可通过支持性护理、皮质类固醇或在严重病例中使用抗 IL-6 制剂（西妥昔单抗/siltuximab）进行控制。未观察到治疗相关的死亡或 ICANS。四名患者出现了感染，但在抗感染治疗后得到缓解。
• 有效性： 在第 30 天，7 名患者中的 6 名（85.7%）达到了完全缓解（CR）。一名患者达到 MRD 阳性的 CR，其余五名患者达到 MRD 阴性的 CR。一名患者无反应（NR）。
• 长期结局： 所有患者均接受了桥接异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）。在中位随访时间为 8.3 个月的情况下，5 名患者（71.4%）维持了持续完全缓解（CCR），持续时间从 4.7 到 24.4 个月不等。一名患者在移植后 7 个月出现复发。无反应者在移植后 6.9 个月出现血液学和髓外复发，并死于疾病进展。
• 生物学观察： 在所有患者中均观察到 CAR-T 细胞扩增，峰值绝对计数出现在输注后 12–15 天。所有患者均携带多种基因突变，包括 IKZF1、NOTCH1 和 RAS 通路中的突变。值得注意的是，携带 RPN1-MECOM 融合基因和 IKZF1 突变的患者在移植后出现了复发。

意义与声明
作者声称，对于 CD7 阳性的 R/R MPAL 患者，hCD7 CAR-T 疗法是一种可行且有效的挽救策略，其完全缓解率高达 85.7%，且安全性可控。研究表明，通过 hCD7 CAR-T 治疗达到缓解可以作为异基因造血干细胞移植的成功桥接，从而可能为这一预后极差的疾病群体实现持久缓解。

本文保持了谦逊的基调，承认了研究的局限性，如样本量较小（n=7）、回顾性研究性质以及单中心设计。作者明确指出，尽管结果令人鼓舞，但仍需要更大规模的多中心临床试验来验证这些发现，并进一步阐明特定基因突变（如 IKZF1 和 RPN1-MECOM）在 MPAL 治疗背景下的预后影响。该研究并未提出超出观察到的临床用途之外的新应用，而是强调了 CD7 作为此类难治性疾病特定靶点的潜力。