Permeation improvement and prolonged skin deposition of silymarin through shatdhauta ghrita cream: Formulation, dermatokinetic and anti-aging studies

Resumen Técnico: Mejora de la permeación y prolongación de la deposición cutánea de la silimarina mediante crema de Shatdhauta Ghrita

Planteamiento del problema
El envejecimiento cutáneo es impulsado por factores intrínsecos y extrínsecos, particularmente la radiación solar (UVA/UVB), que genera especies reactivas de oxígeno (ROS). Estas ROS causan estrés oxidativo, lo que conduce a la degradación del colágeno, la pérdida de firmeza de la piel y la disfunción de la barrera. La silimarina (SMN), un complejo de flavonoides con conocidas propiedades antioxidantes y antiinflamatorias, es un candidato prometedor para la terapia tópica antienvejecimiento. Sin embargo, su utilidad clínica es limitada debido a que está clasificada como un fármaco de la Clase IV de la BCS, caracterizado por una baja solubilidad en agua y una pobre permeabilidad cutánea. En consecuencia, existe la necesidad de un vehículo capaz de mejorar la permeación de la SMN y asegurar su deposición en las capas más profundas de la epidermis y la dermis.

Metodología
El estudio desarrolló una formulación de crema tópica incorporando silimarina en Shatdhauta Ghrita (SDG), una base ayurvédica tradicional preparada lavando la mantequilla clarificada (ghee) con agua 100 veces. Este proceso tiene como objetivo dividir las grasas y crear una emulsión fina y no aceitosa.

La metodología de investigación incluyó:

• Formulación: Preparación de la crema de SDG cargada con SMN con conservantes y ajuste de pH.
• Caracterización fisicoquímica: Evaluación de propiedades organolépticas, pH, viscosidad, capacidad de esparcimiento, tamaño de partícula (mediante dispersión de luz dinámica) y análisis de perfil de textura (TPA) para dureza, cohesividad y trabajo de cohesión.
• Validación analítica: Desarrollo y validación de un método de HPLC para la cuantificación de la silimarina.
• Estudios de permeación: Permeación in vitro a través de membranas de celofán y permeación ex vivo a través de piel de cabra excisa utilizando celdas de difusión de Franz.
• Dermatocinética: Evaluación de la deposición del fármaco en las capas epidérmica y dérmica durante 8 horas para determinar $C_{Skin\ max}$, $T_{Skin\ max}$ y $AUC_{0-8h}$.
• Evaluación biológica:
  • Actividad antioxidante in vitro mediante el ensayo de eliminación de radicales DPPH.
  • Pruebas de irritación cutánea en ratas Wistar (guías OECD-402).
  • Eficacia antienvejecimiento en células de fibroblastos dérmicos de ratón neonatal, midiendo biomarcadores incluyendo Malondialdehído (MDA), Superóxido Dismutasa (SOD), Glutatión (GSH) y niveles de colágeno tras la inducción de estrés oxidativo ($H_2O_2$).
• Estabilidad: Estudios de almacenamiento a 30 °C y 35 °C durante 60 días para determinar la vida útil.

Resultados clave

• Propiedades fisicoquímicas: La crema desarrollada fue homogénea con un pH de 6.4 ± 0.01 y una viscosidad de 10,601 ± 0.57 cps. Exhibió una capacidad de esparcimiento superior (16.50 g.cm/seg) en comparación con una formulación comercializada (21.63 g.cm/seg) y un tamaño de partícula significativamente menor (486 nm frente a 1944 nm). El análisis TPA indicó que la crema de SDG era más suave (menor firmeza) y menos pegajosa que el producto comercializado.
• Permeación: La base de SDG mejoró significamente el flujo del fármaco. Durante 8 horas, la permeación acumulada a través de la piel fue de 364.13 µg/cm² para la crema SMN-SDG frente a 134.76 µg/cm² para la crema comercializada. El flujo promedio a través de la piel fue de 45.51 µg/cm²/h para la SMN-SDG en comparación con 16.84 µg/cm²/h para el control.
• Dermatocinética: La formulación de SMN-SDG demostró una mayor deposición de fármaco tanto en la epidermis como en la dermis. La $C_{Skin\ max}$ en la epidermis fue de 180.88 µg/cm² (frente a 95.69 µg/cm² para la comercializada) y en la dermis fue de 192.15 µg/cm² (frente a 90.64 µg/cm² para la comercializada). El Área Bajo la Curva (AUC) también fue significativamente mayor, indicando una exposición prolongada.
• Actividad antioxidante y antienvejecimiento: La crema SMN-SDG mostró una actividad de eliminación de DPPH del 96.07%, comparable al ácido ascórbico (98.41%). En los estudios de líneas celulares, la formulación disminuyó significativamente los niveles de MDA y Óxido Nítrico (NO) mientras aumentó los niveles de SOD, GSH y colágeno en comparación con los controles (p < 0.05). El valor de EC50 para la crema SMN-SDG (26.65 µg/ml) fue inferior al de la base o la silimarina sola, lo que sugiere un efecto sinérgico.
• Seguridad y estabilidad: La formulación no fue irritante en modelos de rata. Los datos de estabilidad indicaron que la crema se mantuvo física y químicamente estable durante 60 días, con una vida útil calculada de 1.26 años.

Significancia y afirmaciones
Los autores concluyen que el Shatdhauta Ghrita sirve como un vehículo eficaz para la entrega de fármacos de baja solubilidad y baja permeabilidad como la silimarina. El estudio afirma que el método de preparación específico de SDG (100 lavados) reduce el tamaño de la gota y aumenta la superficie, actuando así como un potenciador de la permeación. La formulación mejoró con éxito la deposición cutánea de la silimarina y potenció sus efectos antioxidantes y antienvejecimiento en comparación con una formulación comercializada. El artículo sostiene que esta base tradicional puede utilizarse eficazmente para superar los pasos limitantes de la absorción de fitoconstituyentes hidrofóbicos, ofreciendo una solución tópica estable y eficaz para el envejecimiento cutáneo.