Permeation improvement and prolonged skin deposition of silymarin through shatdhauta ghrita cream: Formulation, dermatokinetic and anti-aging studies

Resumo Técnico: Melhoria da Permeação e Deposição Prolongada na Pele de Silimarina através de Creme de Shatdhauta Ghrita

Declaração do Problema
O envelhecimento cutâneo é impulsionado por fatores intrínsecos e extrínsecos, particularmente a radiação solar (UVA/UVB), que gera espécies reativas de oxigênio (ERO). Estas ERO causam estresse oxidativo, levando à degradação do colágeno, perda de firmeza da pele e disfunção da barreira. A silimarina (SMN), um complexo de flavonoides com conhecidas propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias, é um candidato promissor para a terapia tópica antienvelhecimento. No entanto, sua utilidade clínica é limitada porque é classificada como um fármaco da Classe IV do BCS, caracterizado pela baixa solubilidade em água e baixa permeabilidade cutânea. Consequentemente, há uma necessidade de um veículo capaz de aumentar a permeação da SMN e garantir sua deposição nas camadas mais profundas da epiderme e da derme.

Metodologia
O estudo desenvolveu uma formulação de creme tópico incorporando silimarina em Shatdhauta Ghrita (SDG), uma base ayurvédica tradicional preparada lavando a manteiga clarificada (ghee) com água 100 vezes. Este processo destina-se a dividir as gorduras e criar uma emulsão fina e não oleosa.

A metodologia de pesquisa incluiu:

• Formulação: Preparação de creme de SDG carregado com SMN com conservantes e ajuste de pH.
• Caracterização Físico-Química: Avaliação de propriedades organolépticas, pH, viscosidade, espalhabilidade, tamanho de partícula (via dispersão de luz dinâmica) e análise de perfil de textura (TPA) para dureza, coesividade e trabalho de coesão.
• Validação Analítica: Desenvolvimento e validação de um método de HPLC para quantificação de silimarina.
• Estudos de Permeação: Permeação in vitro através de membranas de celofane e permeação ex vivo através de pele de cabra excisada utilizando células de difusão de Franz.
• Dermatocinética: Avaliação da deposição de fármaco nas camadas epidérmica e dérmica ao longo de 8 horas para determinar $C_{Skin\ max}$, $T_{Skin\ max}$ e $AUC_{0-8h}$.
• Avaliação Biológica:
  • Atividade antioxidante in vitro via ensaio de sequestro de radicais DPPH.
  • Teste de irritação cutânea em ratos Wistar (diretrizes OECD-402).
  • Eficácia antienvelhecimento em células de fibroblastos dérmicos de camundongos neonatais, medindo biomarcadores incluindo Malondialdeído (MDA), Superóxido Dismutase (SOD), Glutatião (GSH) e níveis de colágeno após indução de estresse oxidativo ($H_2O_2$).
• Estabilidade: Estudos de armazenamento a 30°C e 35°C por 60 dias para determinar a vida útil.

Principais Resultados

• Propriedades Físico-Químicas: O creme desenvolvido foi homogêneo com um pH de 6,4 ± 0,01 e uma viscosidade de 10.601 ± 0,57 cps. Exibiu espalhabilidade superior (16,50 g.cm/seg) em comparação com uma formulação comercializada (21,63 g.cm/seg) e um tamanho de partícula significativamente menor (486 nm vs. 1944 nm). A análise TPA indicou que o creme de SDG era mais macio (menor firmeza) e menos pegajoso que o produto comercializado.
• Permeação: A base de SDG aumentou significativamente o fluxo de fármaco. Ao longo de 8 horas, a permeação cumulativa através da pele foi de 364,13 µg/cm² para o creme de SMN-SDG versus 134,76 µg/cm² para o creme comercializado. O fluxo médio através da pele foi de 45,51 µg/cm²/h para o SMN-SDG comparado a 16,84 µg/cm²/h para o controle.
• Dermatocinética: A formulação de SMN-SDG demonstrou maior deposição de fármaco tanto na epiderme quanto na derme. O $C_{Skin\ max}$ na epiderme foi de 180,88 µg/cm² (vs. 95,69 µg/cm² para o comercializado) e na derme foi de 192,15 µg/cm² (vs. 90,64 µg/cm² para o comercializado). A Área Sob a Curva (AUC) também foi significativamente maior, indicando exposição prolongada.
• Atividade Antioxidante e Antienvelhecimento: O creme de SMN-SDG mostrou uma atividade de sequestro de DPPH de 96,07%, comparável ao ácido ascórbico (98,41%). Em estudos de linhagem celular, a formulação diminuiu significativamente os níveis de MDA e Óxido Nítrico (NO) enquanto aumentou os níveis de SOD, GSH e colágeno em comparação aos controles (p < 0,05). O valor de EC50 para o creme de SMN-SDG (26,65 µg/ml) foi inferior ao da base ou da silimarina isolada, sugerindo um efeito sinérgico.
• Segurança e Estabilidade: A formulação não foi irritante em modelos de ratos. Os dados de estabilidade indicaram que o creme permaneceu fisicamente e quimicamente estável durante 60 dias, com uma vida útil calculada de 1,26 anos.

Significância e Alegações
Os autores concluem que o Shatdhauta Ghrita serve como um veículo eficaz para a entrega de fármacos de baixa solubilidade e baixa permeabilidade, como a silimarina. O estudo afirma que o método de preparação específico do SDG (100 lavagens) reduz o tamanho das gotículas e aumenta a área de superfície, atuando como um potencializador de permeação. A formulação melhorou com sucesso a deposição cutânea de silimarina e potenciou seus efeitos antioxidantes e antienvelhecimento em comparação com uma formulação comercializada. O artigo sustenta que esta base tradicional pode ser efetivamente utilizada para superar as etapas limitantes de absorção de fitoconstituintes hidrofóbicos, oferecendo uma solução tópica estável e eficaz para o envelhecimento cutâneo.