“Biofilm Formation Among Clinical Urinary Isolates of Enterococcus Species:   A Comparative Evaluation of Tissue Culture Plate, Congo Red Agar and Tube Methods in a Tertiary Care Hospital”.

Nel corpo umano, i batteri vivono spesso in comunità che sono molto più resilienti dei loro corrispettivi solitari. Quando questi microrganismi aderiscono a una superficie — che sia un dispositivo medico o il rivestimento di un organo — secernono un muco appiccicoso e protettivo. Questo strato, noto come biofilm, agisce come una fortezza, schermando i batteri dalle difese immunitarie del corpo e rendendoli significativamente più difficili da uccidere con gli antibiotici standard. Questo fenomeno è una preoccupazione maggiore negli ospedali, dove le infezioni possono diventare croniche e difficili da trattare. Tra i batteri che formano questi strati protettivi, un gruppo chiamato Enterococcus è particolarmente comune nelle infezioni del tratto urinario. Questi organismi, che abitano naturalmente l'intestino, possono causare seri problemi quando migrano nel sistema urinario, specialmente in pazienti che sono già malati o che hanno dispositivi medici come cateteri in sede. Capire quanto bene questi batteri costruiscono il loro muco protettivo, e trovare il modo migliore per rilevarlo in laboratorio, è fondamentale per i medici che cercano di gestire le infezioni persistenti.

Un team di ricercatori presso un ospedale di terzo livello a Mysuru, in India, si è posto l'obiettivo di indagare esattamente quanto spesso questi batteri urinari formano biofilm e di determinare quale test di laboratorio sia il più affidabile per individuarli. Hanno raccolto campioni di urine da 133 pazienti con infezioni da Enterococcus confermate. Il team si è concentrato sulle due specie più comuni riscontrate in queste infezioni: E. faecalis ed E. faecium. Per vedere quanto bene i batteri costruissero i loro strati protettivi, gli scienziati hanno utilizzato tre diversi metodi di test. Il primo era il metodo della piastra di coltura tissutale, in cui i batteri venivano coltivati in piccoli pozzetti e colorati con un colorante viola per misurare quanto muco producevano. Il secondo era il metodo dell'agar Congo red, che prevede la crescita dei batteri su una speciale gelatina di colore rosso; se i batteri producevano un biofilm spesso, le colonie diventavano nere e asciutte. Il terzo era il metodo del tubo, in cui i batteri venivano coltivati in un liquido all'interno di tubi di vetro, e la presenza di una pellicola visibile sulle pareti del tubo indicava la formazione di biofilm.

I risultati hanno rivelato che la formazione di biofilm è un tratto molto comune tra questi batteri urinari. Su i 133 campioni testati, il metodo della piastra di coltura tissutale, che i ricercatori consideravano lo standard più accurato, ha identificato che 75 degli isolati producevano biofilm. Ciò significa che più della metà dei batteri studiati era capace di costruire queste strutture protettive. Quando i ricercatori hanno suddiviso i risultati per specie, hanno scoperto che l'E. faecalis era molto più propenso a formare biofilm rispetto all'E. faecium. Infatti, la differenza nella produzione di biofilm tra le due specie era statisticamente significativa, con l'E. faecalis che mostrava una tendenza molto più forte a creare questi strati protettivi. Lo studio ha anche esaminato se la presenza di un catetere urinario o la gravità dell'infezione cambiassero i risultati. Sebbene i biofilm siano stati trovati sia in pazienti cateterizzati che non cateterizzati, così come in infezioni semplici e complicate, i dati non hanno mostrato un chiaro legame statistico tra il tipo di infezione e la probabilità di formazione del biofilm.

Forse il risultato più importante dello studio è stato il confronto tra i tre metodi di test. I ricercatori hanno scoperto che i metodi non sempre concordavano tra loro. Il metodo della piastra di coltura tissutale ha rilevato il maggior numero di produttori di biofilm, identificando 75 casi positivi. Al contrario, il metodo dell'agar Congo red ha trovato 64 casi positivi, e il metodo del tubo ne ha trovati 61. Il metodo della piastra di coltura tissutale è stato particolarmente efficace nel individuare i produttori di biofilm deboli e moderati che gli altri due metodi a volte perdevano. Il metodo del tubo era buono nell'identificare i produttori forti, ma faticava a distinguere tra i produttori deboli e quelli che non producevano affatto biofilm. Il metodo dell'agar Congo red, pur essendo utile, è stato il meno sensibile dei tre, fallendo spesso nel rilevare i batteri che il metodo della piastra di coltura tissutale aveva colto.

Lo studio conclude che la formazione di biofilm è una caratteristica diffusa e significativa delle infezioni da Enterococcus urinario, in particolare quelle causate da E. faecalis. Poiché questi strati protettivi rendono le infezioni più difficili da trattare, l'accurata rilevazione di essi è vitale per l'assistenza al paziente. I ricercatori hanno scoperto che il metodo della piastra di coltura tissutale è lo strumento più affidabile per questo compito, offrendo un quadro più completo di quali batteri stiano formando biofilm rispetto agli altri test tradizionali. Ciò suggerisce che i laboratori che mirano a comprendere la persistenza delle infezioni delle vie urinarie dovrebbero dare priorità a questo approccio quantitativo. Identificando in modo più accurato questi batteri produttori di biofilm, i medici potrebbero essere meglio equipaggiati per gestire le infezioni ricorrenti e migliorare gli esiti per i pazienti che lottano contro questi ostinati invasori microbici.