Sitagliptin ameliorates liver fibrosis through reducing inflammation and sestrin2 through Nrf2/SOD in cholestasis rats

Resumo Técnico: A Sitagliptina Melhora a Fibrose Hepática em Ratos com Colestase via Vias Nrf2/SOD e Sestrina2

Definição do Problema
A colestase, caracterizada pelo fluxo biliar prejudicado, leva à lesão hepática grave, fibrogênese progressiva e potencial insuficiência hepática. A patogênese envolve o acúmulo de ácidos biliares citotóxicos e bilirrubina, que desencadeiam estresse oxidativo e a liberação de citocinas pró-inflamatórias (ex: TNF-α, TGF-β). Embora os mecanismos não estejam totalmente definidos, espécies reativas de oxigênio (ROS) e sinalização inflamatória são identificadas como os principais indutores do dano tecidual. A pesquisa atual busca agentes terapêuticos que possam mitigar essas cascatas oxidativas e inflamatórias para prevenir a fibrose. A Sitagliptina, um inibidor da dipeptidil peptidase-4 (DPP4) utilizado primariamente para diabetes tipo II, demonstrou propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias em outros modelos, mas sua eficácia na obstrução biliar induzida por colestase requer investigação.

Metodologia
O estudo utilizou um modelo de rato com colestase extra-hepática induzida por ligadura do ducto biliar (BDL).

• Sujeitos: 35 ratos Wistar machos foram randomizados em cinco grupos (n=7 por grupo): Sham, BDL (não tratado) e três grupos BDL tratados com Sitagliptina em doses de 10, 50 ou 100 mg/kg.
• Procedimento: Após a cirurgia de BDL (ou laparotomia sham), os ratos receberam por gavagem oral Sitagliptina ou salina durante 14 dias.
• Avaliações:
  • Bioquímica: Os níveis séricos de glicose, bilirrubina total (T-bil), fosfatase alcalina (ALP) e lactato desidrogenase (LDH) foram medidos.
  • Marcadores de Estresse Oxidativo: O tecido hepático foi analisado quanto ao Malondialdeído (MDA), atividade da Superóxido Dismutase (SOD), Capacidade Antioxidante Total (TAC) e níveis de Nrf2 via ELISA.
  • Inflamação e Fibrose: Os níveis hepáticos de TNF-α, TGF-β e Sestrina2 foram quantificados. O conteúdo de hidroxiprolina foi medido para avaliar a deposição de colágeno.
  • Histopatologia: Os tecidos hepáticos foram submetidos à coloração H&E para avaliar a necroinflamação e à coloração de Masson's tricrômica para graduar os escores de fibrose com base na deposição de colágeno.
• Análise Estatística: Os dados foram analisados por meio de ANOVA de uma via com teste post hoc de Tukey ou Kruskal-Wallis com teste de Mann-Whitney U, com significância definida em P<0,05.

Resultados Principais

• Lesão Hepática e Enzimas: A BDL aumentou significativamente o peso do fígado, a ALP sérica, a LDH e a bilirrubina total em comparação com o grupo sham. O tratamento com Sitagliptina na dose de 10 mg/kg reduziu significativamente a ALP sérica, enquanto todas as doses mostraram uma melhora dependente da dose nos níveis de LDH, com 100 mg/kg apresentando o melhor efeito. Notavelmente, a Sitagliptina preveniu a queda da glicose sérica induzida pela BDL.
• Estresse Oxidativo e Defesa Antioxidante: A BDL induziu uma redução significativa na atividade da SOD, na TAC e nos níveis de Nrf2, juntamente com um aumento no MDA (peroxidação lipídica). O tratamento com Sitagliptina restaurou as defesas antioxidantes. A dose de 10 mg/kg foi identificada como a mais eficaz na restauração da atividade da SOD, da TAC e na redução dos níveis de MDA.
• Sestrina2 e Inflamação: A BDL aumentou a Sestrina2 hepática (uma proteína induzida pelo estresse), o TNF-α e o TGF-β. O tratamento com Sitagliptina em todas as doses reduziu significativamente os níveis de Sestrina2, TNF-α e TGF-β.
• Fibrose e Histologia: A BDL resultou em fibrose significativa e deposição de colágeno (aumento de hidroxiprolina). Embora todas as doses de Sitagliptina tenham reduzido o TGF-β e o conteúdo de hidroxiprolina, apenas a dose de 10 mg/kg reduziu significativamente o escore de fibrose histológica em comparação com o grupo BDL não tratado.
• Resposta à Dose: O estudo observou que doses mais baixas (especificamente 10 mg/kg) foram frequentemente mais eficazes na modulação de marcadores antioxidantes e fibróticos específicos do que doses mais altas (50 e 100 mg/kg).

Significância e Alegações
O artigo conclui que a Sitagliptina mitiga a fibrose hepática induzida por BDL em ratos. Os autores atribuem esse efeito protetor à capacidade do fármaco de suprimir o estresse oxidativo e a sinalização inflamatória. Especificamente, o estudo afirma que a Sitagliptina:

1. Melhora a Defesa Antioxidante: Ela restaura a via Nrf2/SOD, aumentando a capacidade do fígado de neutralizar ROS.
2. Reduz a Resposta ao Estresse: Ela reduz a expressão da Sestrina2, um marcador de estresse celular.
3. Atenua a Fibrose: Ao reduzir citocinas pró-fibróticas (TGF-β) e a inflamação (TNF-α), a Sitagliptina diminui a deposição de colágeno e melhora a histologia hepática.

Os autores enfatizam que os efeitos benéficos são particularmente evidentes em doses mais baixas (10 mg/kg), sugerindo uma janela terapêutica onde a Sitagliptina atua como um potente modulador do sistema redox e das vias inflamatórias na lesão hepática colestática. O estudo posiciona a Sitagliptina não meramente como um agente anti-hiperglicemiante, mas como um potencial agente hepatoprotetor capaz de abordar os direcionadores oxidativos e inflamatórios da fibrose hepática.