The application of toluidine blue staining in intraoperative cell imprint and frozen section rapid freezing diagnosis

Quando um cirurgião está operando, o relógio está correndo. Se um paciente tem um tumor, o cirurgião precisa saber imediatamente se ele é canceroso e se as bordas do tecido removido estão limpas. Essa decisão ocorre frequentemente enquanto o paciente ainda está na mesa de operação. Para obter essa resposta, um patologista pega um pequeno pedaço do tecido fresco, congela-o e o cora com um corante para que possa ser visto sob um microscópio. O corante mais comum usado por décadas é uma combinação de duas substâncias químicas que tornam os núcleos celulares azuis e o material circundante rosa. Este método é confiável, mas leva tempo e exige manuseio cuidadoso. Nos últimos anos, um corante diferente e mais antigo, o azul de toluidina, foi revisitado. Este corante é conhecido por corar os núcleos celulares com um azul profundo e nítido muito rapidamente, mas não mostra tão bem os detalhes das células circundantes. A questão para a medicina moderna é se este corante mais rápido e simples pode substituir ou complementar o método tradicional sem sacrificar a precisão necessária para salvar uma vida.

Pesquisadores de hospitais em Kunming, China, propuseram-se a responder a esta questão com uma comparação direta. Eles coletaram amostras de tecido de 348 pacientes submetidos a cirurgias para diversas condições, incluindo tumores na mama, pulmão, útero e tireoide. Eles não olharam apenas para um método; testaram quatro formas diferentes de preparar e corar essas amostras de tecido lado a lado. O primeiro método foi a forma tradicional, feita à mão com o corante padrão azul e rosa. O segundo foi o mesmo corante padrão, mas processado por uma máquina para garantir a consistência. O terceiro método envolveu o congelamento do tecido e a coloração com o azul de toluidina de ação rápida. O quarto método foi ainda mais rápido: em vez de cortar uma fina fatia de tecido congelado, os pesquisadores pressionaram a superfície fresca e cortada do tecido diretamente contra uma lâmina de vidro para deixar uma impressão das células, e então coraram essa impressão com azul de toluidina. Eles então compararam quanto tempo cada método levou, quão claras as imagens pareciam e com que frequência o diagnóstico coincidia com o resultado final confirmado pelo teste laboratorial padrão.

Os resultados mostraram uma clara troca entre velocidade e detalhe. O impresso celular de azul de toluidina foi, de longe, o mais rápido, levando de menos de meio minuto a pouco menos de quatro minutos e meio para ser concluído. Isso foi significativamente mais rápido do que tanto o método manual quanto o método por máquina, que levaram quase sete minutos e seis minutos, respectivamente. No entanto, a velocidade veio com um custo na qualidade visual. Quando os pesquisadores avaliaram as imagens com base em quão bem as células pareciam, o método tradicional corado por máquina produziu os melhores resultados, seguido de perto pela versão manual. As secções de congelamento com azul de toluidina foram ligeiramente menos claras, e o impresso celular de azul de toluidina foi o menos claro de todos. O principal problema com o método do azul de toluidina foi que, embora pintasse os núcleos celulares com detalhes intensos e nítidos, deixava o restante da célula parecendo um tanto vago. Era excelente para mostrar o núcleo, que é o centro de controle da célula, mas pobre em mostrar o citoplasma, que é o corpo da célula. Essa falta de detalhe tornou mais difícil distinguir entre diferentes tipos de crescimentos benignos, ou não cancerosos.

Apesar dessas diferenças visuais, o poder diagnóstico dos métodos contou uma história mais matizada. Quando se tratava de identificar tumores cancerosos, ou malignos, todos os quatro métodos desempenharam-se igualmente bem. Cada um dos métodos identificou corretamente lesões malignas com uma taxa de precisão superior a 95 por cento. Nesses casos, a nitidez do núcleo proporcionada pelo azul de toluidina foi suficiente para o patologista tomar a decisão correta. No entanto, a história mudou ao observar tumores benignos ou tecidos não cancerosos. Aqui, os métodos tradicionais, fosse por mão ou por máquina, foram significativamente mais precisos. O impresso celular de azul de toluidina, em particular, teve dificuldades em distinguir entre crescimentos inofensivos e tecido normal. Devido a isso, os pesquisadores concluíram que, embora o impresso celular de azul de toluidina não seja confiável o suficiente para servir como um diagnóstico definitivo independente para condições benignas, ele permanece qualificado para o diagnóstico intraoperatório rápido de tumores malignos. É melhor usado como uma ferramenta de triagem rápida especificamente para identificar lesões malignas.

O estudo sugere um caminho prático para as salas de operação. O método tradicional corado por máquina continua sendo o padrão ouro para a maior qualidade de imagem e o diagnóstico mais confiável em todos os tipos de tecido. No entanto, a secção de congelamento com azul de toluidina oferece um equilíbrio muito bom, fornecendo resultados confiáveis para a maioria dos casos, sendo mais rápida que o método tradicional manual. O impresso celular de azul de toluidina, com sua velocidade extrema, serve a um propósito diferente. Não é um substituto para o diagnóstico completo de condições benignas, mas atua como uma ferramenta de triagem rápida para o câncer. Se um cirurgião precisa saber em menos de cinco minutos se um nódulo suspeito é provavelmente câncer, o impresso de azul de toluidina pode fornecer essa resposta rapidamente. Se o resultado for positivo para malignidade, o cirurgião pode prosseguir com confiança. Se o resultado for negativo, ou se o tecido parecer benigno, mas o impresso estiver pouco claro, a equipe pode então confiar nos métodos tradicionais mais detalhados para confirmar o diagnóstico final. Esta abordagem permite que as equipes médicas utilizem a ferramenta certa para o momento específico, equilibrando a necessidade de velocidade com a absoluta necessidade de precisão.