Development and validation of an HPTLC method for simultaneous determination of gliclazide and sitagliptin phosphate monohydrate in tablets

No mundo da medicina, o controle dos níveis de açúcar no sangue para pessoas com diabetes tipo 2 frequentemente exige uma abordagem de equipe. Assim como uma única ferramenta pode não consertar uma máquina complexa, um único medicamento às vezes não consegue manter o açúcar no sangue sob controle. Os médicos frequentemente prescrevem uma combinação de dois medicamentos diferentes para enfrentar o problema por dois ângulos ao mesmo tempo. Um medicamento, chamado gliclazida, é uma sulfonilureia antidiabética usada no tratamento do diabetes mellitus tipo 2. O outro, sitagliptina, é um inibidor da dipeptidil peptidase-4 (DPP-4). Quando esses dois medicamentos são misturados em uma única pílula, isso torna o tratamento mais fácil para os pacientes, mas cria um novo desafio para os cientistas que garantem que as pílulas sejam seguras e eficazes. Eles devem ser capazes de provar que cada comprimido contém exatamente a quantidade certa de ambos os fármacos, sem ingredientes extras ou faltantes. Para fazer isso, eles precisam de uma maneira de separar as duas substâncias e medi-las com precisão, mesmo quando estão misturadas em um comprimido complexo.

Pesquisadores do Laxminarayandev College of Pharmacy em Gujarat, Índia, propuseram-se a criar uma maneira melhor de realizar essa verificação. Eles desenvolveram um novo método de teste que utiliza uma técnica chamada cromatografia em camada delgada de alto desempenho. Imagine uma placa plana e lisa revestida com uma camada especial de sílica gel, semelhante ao material encontrado nos pacotes de dessecante que mantêm os sapatos secos. Os cientistas colocaram pequenas quantidades da mistura de fármacos sobre essa placa. Eles então deixaram uma mistura líquida, atuando como um transportador móvel, viajar pela placa. À medida que o líquido se movia, ele carregava os dois fármacos com ele. Como os dois fármacos interagem com a placa e com o líquido de maneiras ligeiramente diferentes, eles viajaram em velocidades diferentes e pararam a distâncias diferentes. Essa separação permitiu aos pesquisadores ver os dois fármacos como bandas distintas e separadas na placa, em vez de uma única mistura borrada.

A equipe ajustou cuidadosamente os ingredientes do transportador líquido, misturando metanol, acetato de etila, tolueno e uma pequena quantidade de amônia em proporções específicas. Eles descobriram que essa mistura específica permitia que os fármacos se separassem claramente. Um fármaco parou perto do terço inferior da placa, enquanto o outro viajou muito mais para cima, deixando um espaço claro entre eles. Uma vez separados, os cientistas usaram um scanner especial para medir quanta luz os fármacos absorveram em uma cor específica de luz. Essa medição informou exatamente quanto de cada fármaco estava presente na amostra. O método provou ser altamente sensível, capaz de detectar até mesmo os menores traços dos medicamentos, em quantidades tão pequenas quanto trinta e dois nanogramas para um fármaco e sessenta e nove nanogramas para o outro. Um nanograma é um bilionésimo de grama, uma escala tão pequena que é difícil de visualizar sem um ponto de referência; é aproximadamente equivalente ao peso de um único grão de poeira comparado ao peso de um caminhão grande.

Para garantir que seu novo método fosse confiável, os pesquisadores o submeteram a uma série de testes rigorosos. Eles verificaram se os resultados eram consistentes executando a mesma amostra várias vezes e descobriram que os números permaneciam muito próximos todas as vezes. Eles testaram o método em dias diferentes e com diferentes operadores para garantir que funcionasse de forma confiável sob condições normais de laboratório. Eles também verificaram a precisão adicionando quantidades conhecidas dos fármacos às amostras e vendo se o método as encontrava. Os resultados mostraram que o método poderia recuperar entre noventa e nove e cento e dois por cento dos fármacos, o que é um nível excelente de precisão. Eles até testaram a durabilidade do método fazendo pequenas mudanças deliberadas na mistura líquida e no tempo do experimento, e os resultados permaneceram estáveis, provando que o método é robusto contra pequenas variações.

Finalmente, a equipe aplicou sua nova técnica a um produto real: um comprimido comercializado chamado Cyblex S 60 XR. Este comprimido deve conter uma quantidade específica de gliclazida e sitagliptina. Quando os pesquisadores analisaram esses comprimidos, descobriram que as quantidades reais de medicamento dentro deles correspondiam quase perfeitamente aos rótulos. O teste mostrou que os comprimidos continham noventa e nove vírgula quarenta e três por cento da quantidade rotulada de gliclazida e noventa e nove vírgula noventa por cento da quantidade rotulada de sitagliptina. Essas descobertas confirmaram que o novo método não é apenas cientificamente sólido, mas também prático para uso cotidiano em laboratórios de controle de qualidade. Ele oferece uma maneira rápida, confiável e de baixo custo para garantir que os pacientes recebam a dosagem correta de seu medicamento vital, proporcionando uma base sólida para a segurança deste tratamento comum para o diabetes.