Development and validation of an HPTLC method for simultaneous determination of gliclazide and sitagliptin phosphate monohydrate in tablets

Dans le monde de la médecine, la gestion du taux de glycémie pour les personnes atteintes de diabète de type 2 nécessite souvent une approche d'équipe. Tout comme un seul outil ne peut pas réparer une machine complexe, un seul médicament ne suffit parfois pas à maintenir la glycémie sous contrôle. Les médecins prescrivent fréquemment une combinaison de deux médicaments différents pour aborder le problème sous deux angles à la fois. L'un des médicaments, appelé glitazide, est une sulfonylurée antidiabétique utilisée dans la prise en charge du diabète de type 2 mellitus. L'autre, la sitagliptine, est un inhibiteur de la dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4). Lorsque ces deux médicaments sont mélangés dans un seul comprimé, cela facilite le traitement pour les patients, mais cela crée un nouveau défi pour les scientifiques qui s'assurent que les comprimés sont sûrs et efficaces. Ils doivent être capables de prouver que chaque tablette contient exactement la bonne quantité des deux médicaments, sans ingrédients supplémentaires ou manquants. Pour ce faire, ils ont besoin d'un moyen de séparer les deux substances et de les mesurer avec précision, même lorsqu'elles sont mélangées dans un comprimé complexe.

Des chercheurs du Laxminarayandev College of Pharmacy, dans le Gujarat, en Inde, se sont donné pour mission de créer une meilleure façon d'effectuer ce contrôle. Ils ont développé une nouvelle méthode de test qui utilise une technique appelée chromatographie sur couche mince à haute performance. Imaginez une planche plate et lisse recouverte d'une couche spéciale de gel de silice, similaire au matériau trouvé dans les sachets déshydratants qui gardent les chaussures au sec. Les scientifiques ont placé de minuscules quantités du mélange de médicaments sur cette planche. Ils ont ensuite laissé un mélange liquide, agissant comme un transporteur mobile, monter le long de la planche. À mesure que le liquide se déplaçait, il transportait les deux médicaments avec lui. Parce que les deux médicaments interagissent avec la planche et le liquide de manières légèrement différentes, ils ont voyagé à des vitesses différentes et se sont arrêtés à des distances différentes. Cette séparation a permis aux chercheurs de voir les deux médicaments comme des bandes distinctes et séparées sur la planche plutôt que comme un mélange flou unique.

L'équipe a soigneusement ajusté les ingrédients du transporteur liquide, mélangeant du méthanol, de l'acétate d'éthyle, du toluène et une petite quantité d'ammoniaque dans des proportions spécifiques. Ils ont découvert que ce mélange particulier permettait de séparer nettement les médicaments. Un médicament s'est arrêté près du tiers inférieur de la planche, tandis que l'autre a voyagé beaucoup plus haut, laissant un espace clair entre eux. Une fois séparés, les scientifiques ont utilisé un scanner spécial pour mesurer la quantité de lumière que les médicaments absorbaient à une couleur de lumière spécifique. Cette mesure leur a indiqué exactement quelle quantité de chaque médicament était présente dans l'échantillon. La méthode s'est avérée très sensible, capable de détecter même les traces les plus infimes des médicaments, jusqu'à des quantités aussi petites que trente-deux nanogrammes pour l'un et soixante-neuf nanogrammes pour l'autre. Un nanogramme est un milliardième de gramme, une échelle si petite qu'il est difficile de la visualiser sans un point de référence ; cela équivaut approximativement au poids d'un seul grain de poussière comparé au poids d'un gros camion.

Pour s'assurer que leur nouvelle méthode soit digne de confiance, les chercheurs l'ont soumise à une série de tests rigoureux. Ils ont vérifié si les résultats étaient cohérents en testant le même échantillon plusieurs fois et ont constaté que les chiffres restaient très proches à chaque fois. Ils ont testé la méthode sur différents jours et avec différents opérateurs pour s'assurer qu'elle fonctionnait de manière fiable dans des conditions de laboratoire normales. Ils ont également vérifié l'exactitude en ajoutant des quantités connues de médicaments aux échantillons et en voyant si la méthode parvenait à les trouver. Les résultats ont montré que la méthode pouvait récupérer entre quatre-vingt-dix-neuf et cent deux pour cent des médicaments, ce qui est un excellent niveau de précision. Ils ont même testé la durabilité de la méthode en effectuant de petits changements délibérés dans le mélange liquide et le temps de l'expérience, et les résultats sont restés stables, prouvant que la méthode est robuste face aux variations mineures.

Enfin, l'équipe a appliqué sa nouvelle technique à un produit réel : un comprimé commercialisé appelé Cyblex S 60 XR. Ce comprimé est censé contenir une quantité spécifique de glitazide et de sitagliptine. Lorsque les chercheurs ont analysé ces comprimés, ils ont constaté que les quantités réelles de médicaments à l'intérieur correspondaient presque parfaitement aux étiquettes. Le test a montré que les comprimés contenaient quatre-vingt-dix-neuf virgule quatre-vingt-treize pour cent de la quantité étiquetée de glitazide et quatre-vingt-dix-neuf virgule quatre-vingt-dix pour cent de la quantité étiquetée de sitagliptine. Ces conclusions ont confirmé que la nouvelle méthode est non seulement scientifiquement fondée, mais aussi pratique pour une utilisation quotidienne dans les laboratoires de contrôle de qualité. Elle offre un moyen rapide, fiable et rentable de garantir que les patients reçoivent la dose exacte de leur médicament vital, fournissant une base solide pour la sécurité de ce traitement courant du diabète.