Using p63 Immunohistochemistry during Mohs micrographic surgery for cutaneous squamous cell carcinoma

त्वचा का कैंसर आधुनिक चिकित्सा में एक आम चुनौती है, और इसके सबसे गंभीर रूपों में से एक क्यूटेनियस स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा (cutaneous squamous cell carcinoma) है। इस प्रकार का कैंसर त्वचा की बाहरी परत बनाने वाली चपटी कोशिकाओं से उत्पन्न होता है। हालांकि कई मामले उपचार के लिए सरल होते हैं, कुछ आक्रामक होते हैं और उनमें स्पष्ट सीमाएं नहीं होतीं, जिससे उन्हें पूरी तरह से हटाना कठिन हो जाता है। इसे संबोधित करने के लिए, सर्जन अक्सर मोह्स माइक्रोग्राफिक सर्जरी (Mohs micrographic surgery) नामक एक विशेष तकनीक का उपयोग करते हैं। इस पद्धति में कैंसर की परत दर परत को हटाना शामिल है और प्रत्येक हिस्से की सूक्ष्मदर्शी (microscope) के नीचे तुरंत जांच करना शामिल है ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि कोई भी कैंसर कोशिका शेष न रहे। लक्ष्य स्वस्थ ऊतकों (tissue) को यथासंभव बचाना है जबकि यह गारंटी देना है कि ट्यूमर पूरी तरह से समाप्त हो गया है। हालांकि, जब कैंसर कोशिकाएं 'पुअरली डिफरेंशिएटेड' (poorly differentiated) होती हैं—जिसका अर्थ है कि वे सामान्य त्वचा कोशिकाओं से बहुत अलग दिखती हैं और उनमें विशिष्ट विशेषताएं नहीं होतीं—तो वे एक मानक सूक्ष्मदर्शी जांच के दौरान लगभग अदृश्य हो सकती हैं। यहीं पर नए उपकरण आवश्यक हो जाते हैं, जो अदृश्य को उजागर करने का एक तरीका प्रदान करते हैं और सर्जन के हाथ को अधिक सटीकता के साथ मार्गदर्शन करते हैं।

यूनिवर्सिटी ऑफ रोचेस्टर के शोधकर्ताओं ने हाल ही में इस दृश्यता की समस्या को हल करने के लिए एक विशिष्ट उपकरण की खोज की। उन्होंने एक स्टेनिंग तकनीक (staining technique) पर ध्यान केंद्रित किया जो p63 नामक एक प्रोटीन मार्कर का उपयोग करती है। प्रयोगशाला में, डॉक्टर विशेष रंगों (dyes) का उपयोग करते हैं ताकि कुछ कोशिकाएं सूक्ष्मदर्शी के नीचे चमक सकें, ठीक वैसे ही जैसे अंधेरे कमरे में क्या मौजूद है यह देखने के लिए टॉर्च चालू की जाती है। इस उद्देश्य के लिए उपयोग किया जाने वाला मानक रंग AE1/AE3 के रूप में जाना जाता है, जो त्वचा की कोशिकाओं में पाए जाने वाले संरचनात्मक प्रोटीनों को उजागर करता है। हालांकि यह प्रभावी है, लेकिन इस मानक रंग का एक दोष है: यह स्वस्थ त्वचा की संरचनाओं, जैसे कि पसीने की ग्रंथियों और बालों के रोमों (hair follicles) को भी बहुत चमकीला दिखाता है। यह दृश्य अव्यवस्था (visual clutter) पैदा कर सकता है, जिससे सर्जन के लिए स्वस्थ ऊतक और कैंसर के बीच अंतर करना कठिन हो जाता है। टीम ने यह जांचा कि क्या p63 स्टेन का उपयोग करने या उसे जोड़ने से अधिक स्पष्ट चित्र मिल सकता है, क्योंकि यह मार्कर ज्ञात है कि स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा में बहुत सक्रिय होता है लेकिन आसपास की स्वस्थ त्वचा संरचनाओं में कम सक्रिय होता है।

इस विचार का परीक्षण करने के लिए, टीम ने इस नई स्टेनिंग पद्धति का उपयोग करते हुए सोलह रोगियों के 'पुअरली डिफरेंशिएटेड स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा' का उपचार सर्जरी के दौरान किया। उन्होंने रोगियों से निकाले गए ऊतकों के नमूनों पर p63 स्टेन लगाया, कभी इसे अकेले उपयोग किया तो कभी मानक AE1/AE3 डाई के साथ। इसके बाद सर्जनों और पैथोलॉजिस्टों ने स्लाइड्स की जांच की कि प्रत्येक स्टेन ने कितनी अच्छी तरह काम किया। उन्होंने दो चीजों की तलाश की: कैंसर कोशिकाएं कितनी चमक रही थीं और क्या स्वस्थ त्वचा की संरचनाएं भी चमक रही थीं, जिससे भ्रम पैदा हो सकता था। परिणामों ने दोनों विधियों के बीच एक स्पष्ट अंतर दिखाया। मानक AE1/AE3 स्टेन ने स्वस्थ पसीने की ग्रंथियों और बालों के रोमों को तीव्रता से चमकाया, जिससे एक ऐसा बैकग्राउंड बना जो ट्यूमर से ध्यान भटका सकता था। इसके विपरीत, p63 स्टेन ने इन स्वस्थ संरचनाओं को लगभग पूरी तरह से काला छोड़ दिया, जिससे कैंसर कोशिकाओं का एक साफ, उच्च-कंट्रास्ट दृश्य प्राप्त हुआ।

डेटा से पता चला कि p63 स्टेन कैंसर को उजागर करने में विशेष रूप से अच्छा था। लगभग दस में से नौ मामलों में जहाँ इस स्टेन का उपयोग किया गया था, ट्यूमर कोशिकाओं ने एक मजबूत, स्पष्ट प्रतिक्रिया दिखाई। इसकी तुलना में, मानक स्टेन ने केवल लगभग दस में से छह मामलों में कैंसर कोशिकाओं को मजबूती से उजागर किया। तीन विशिष्ट मामलों में, मानक स्टेन ट्यूमर कोशिकाओं को दिखाने में विफल रहा, जबकि p63 स्टेन ने उन्हें स्पष्ट रूप से दृश्यमान बना दिया। यह सुझाव देता है कि केवल पुराने तरीके पर निर्भर रहने से कभी-कभी कैंसर पीछे छूट सकता है क्योंकि वह बस दिखाई नहीं देता है। शोधकर्ताओं ने यह भी नोट किया कि एक मामले में, मानक स्टेन ने केराटिन (keratin) के अंशों को उजागर किया, जो एक त्वचा प्रोटीन है और ट्यूमर का हिस्सा नहीं था, जिसे कैंसर समझ लिया जा सकता था। p63 स्टेन ने इस भ्रम को पूरी तरह से टाल दिया।

अध्ययन ने इन रोगियों का औसतन बारह महीनों तक पीछा किया ताकि देखा जा सके कि सर्जरी के बाद उनकी स्थिति कैसी रही। इस दौरान, दो रोगियों में मूल स्थान पर कैंसर वापस आया, और दो रोगियों की मृत्यु हो गई। हालांकि, शोधकर्ताओं ने पुष्टि की कि मौतें त्वचा के कैंसर से असंबंधित कारणों से हुई थीं। दोनों पुनरावृत्ति (recurrence) उन मामलों में हुईं जहाँ दोनों स्टेन का उपयोग किया गया था, जो यह दर्शाता है कि हालांकि नया स्टेन दृश्यता में सुधार करता है, लेकिन यह सभी भविष्य की समस्याओं के विरुद्ध गारंटी नहीं है। लेखक निष्कर्ष निकालते हैं कि सर्जरी के दौरान p63 स्टेन का उपयोग करना एक महत्वपूर्ण लाभ प्रदान करता है क्योंकि यह कैंसर को स्वस्थ ऊतक के मुकाबले अधिक स्पष्ट रूप से उभारता है। यह मानक पद्धति को प्रतिस्थापित नहीं करता है बल्कि इसके साथ मिलकर बेहतर काम करता है, जिससे सर्जनों को उन कठिन-से-दिखने वाले ट्यूमर की पहचान करने में मदद मिलती है जो अन्यथा छूट सकते हैं। हालांकि इन निष्कर्षों की पुष्टि करने के लिए रोगियों के बड़े समूहों के साथ अधिक शोध की आवश्यकता है, फिर भी यह दृष्टिकोण त्वचा के कैंसर को हटाने की सटीकता में सुधार करने के लिए बहुत आशाजनक है।