Using p63 Immunohistochemistry during Mohs micrographic surgery for cutaneous squamous cell carcinoma

Il tumore della pelle è una sfida comune nella medicina moderna, e una delle sue forme più gravi è il carcinoma squamocellulare cutaneo. Questo tipo di cancro origina dalle cellule piatte che compongono lo strato esterno della pelle. Sebbene molti casi siano semplici da trattare, alcuni sono aggressivi e mancano di confini netti, rendendo difficile la loro rimozione completa. Per affrontare questo problema, i chirurghi utilizzano spesso una tecnica specializzata chiamata chirurgia micrografica di Mohs. Questo metodo prevede la rimozione del tumore strato dopo strato ed esamina immediatamente ogni pezzo al microscopio per garantire che non rimangano cellule cancerose. L'obiettivo è preservare il maggior numero possibile di tessuti sani garantendo al contempo l'eliminazione del tumore. Tuttavia, quando le cellule cancerose sono scarsamente differenziate — ovvero appaiono molto diverse dalle normali cellule della pelle e mancano di caratteristiche distinte — possono essere quasi invisibili a occhio nudo durante un normale esame microscopico. È qui che nuovi strumenti diventano essenziali, offrendo un modo per evidenziare l'invisibile e guidare la mano del chirurgo con maggiore precisione.

I ricercatori dell'Università di Rochester hanno recentemente esplorato uno strumento specifico per risolvere questo problema di visibilità. Si sono concentrati su una tecnica di colorazione che utilizza un marcatore proteico chiamato p63. In laboratorio, i medici utilizzano coloranti speciali per far sì che certe cellule si illuminino sotto il microscopio, proprio come accendere una torcia in una stanza buia per vedere cosa c'è. Il colorante standard utilizzato per questo scopo è noto come AE1/AE3, che evidenzia le proteine strutturali presenti nelle cellule della pelle. Sebbene efficace, questo colorante standard ha un difetto: illumina anche le strutture cutanee sane, come le ghiandole sudoripare e i follicoli piliferi, spesso in modo molto intenso. Ciò può creare un disordine visivo, rendendo più difficile per il chirurgo distinguere tra il tessuto sano e il tumore. Il team ha indagato se passare alla colorazione p63 o aggiungendola potesse fornire un quadro più chiaro, poiché questo marcatore è noto per essere molto attivo nel carcinoma squamocellulare ma meno attivo nelle strutture cutanee sane circostanti.

Per testare questa idea, il team ha trattato sedici pazienti con carcinoma squamocellulare scarsamente differenziato utilizzando questo nuovo approccio di colorazione durante l'intervento chirurgico. Hanno applicato la colorazione p63 ai campioni di tessuto rimossi dai pazienti, talvolta usandola da sola e altre volte insieme al colorante standard AE1/AE3. I chirurghi e i patologi hanno poi esaminato i vetrini per vedere quanto bene funzionasse ciascun colorante. Cercavano due cose: quanto intensamente le cellule cancerose si illuminassero e se anche le strutture cutanee sane si stessero illuminando, il che avrebbe causato confusione. I risultati hanno mostrato una differenza distinta tra i due metodi. La colorazione standard AE1/AE3 faceva brillare intensamente le ghiandole sudoripare e i follicoli piliferi sani, creando uno sfondo che poteva distrarre dal tumore. Al contrario, la colorazione p63 lasciava queste strutture sane quasi completamente scure, fornendo una visione nitida e ad alto contrasto delle cellule cancerose.

I dati hanno rivelato che la colorazione p63 era particolarmente brava a evidenziare il cancro. In quasi nove casi su dieci in cui è stata utilizzata la colorazione, le cellule tumorali mostravano una reazione forte e chiara. Per confronto, la colorazione standard evidenziava fortemente le cellule tumorali in circa sei casi su dieci. In tre casi specifici, la colorazione standard non riusciva affatto a mostrare le cellule tumorali, mentre la colorazione p63 le rendeva chiaramente visibili. Ciò suggerisce che affidarsi esclusivamente al vecchio metodo potrebbe occasionalmente lasciare dietro di sé del cancro perché semplicemente non riesce a vederlo. I ricercatori hanno anche notato che in un caso, la colorazione standard evidenziava frammenti di cheratina, una proteina della pelle, che non facevano parte di un tumore e che avrebbero potuto essere scambiati per cancro. La colorazione p63 ha evitato interamente questa confusione.

Lo studio ha seguito questi pazienti per una media di dodici mesi per vedere come si fossero comportati dopo l'intervento. Durante questo periodo, due pazienti hanno avuto una recidiva del cancro nel sito originale e due pazienti sono deceduti. Tuttavia, i ricercatori hanno confermato che i decessi sono stati dovuti a cause non correlate al tumore cutaneo. Le due recidive sono avvenute in casi in cui sono stati utilizzati entrambi i coloranti, indicando che, sebbene la nuova colorazione migliori la visibilità, non è una garanzia contro tutti i problemi futuri. Gli autori concludono che l'uso della colorazione p63 durante l'intervento offre un vantaggio significativo rendendo il cancro più evidente rispetto al tessuto sano. Non sostituisce il metodo standard, ma funziona meglio quando usato insieme, aiutando i chirurghi a identificare tumori difficili da vedere che potrebbero altrimenti essere persi. Sebbene siano necessarie ulteriori ricerche con gruppi di pazienti più ampi per confermare questi risultati, questo approccio mostra una grande promessa per migliorare l'accuratezza della rimozione del tumore cutaneo.