Using p63 Immunohistochemistry during Mohs micrographic surgery for cutaneous squamous cell carcinoma

O câncer de pele é um desafio comum na medicina moderna, e uma de suas formas mais graves é o carcinoma espinocelular cutâneo. Este tipo de câncer surge das células achatadas que compõem a camada externa da pele. Embora muitos casos sejam simples de tratar, alguns são agressivos e carecem de limites claros, tornando difícil a sua remoção completa. Para enfrentar isso, os cirurgiões frequentemente utilizam uma técnica especializada chamada cirurgia micrográfica de Mohs. Este método envolve a remoção da camada de câncer camada por camada, examinando imediatamente cada pedaço sob um microscópio para garantir que não restem células cancerígenas. O objetivo é preservar o máximo possível de tecido saudável, garantindo ao mesmo tempo que o tumor seja eliminado. No entanto, quando as células cancerígenas são pouco diferenciadas — ou seja, parecem muito diferentes das células da pele normal e carecem de características distintas — elas podem ser quase invisíveis a olho nu durante um exame microscópico padrão. É aqui que novas ferramentas se tornam essenciais, oferecendo uma maneira de destacar o invisível e guiar a mão do cirurgião com maior precisão.

Pesquisadores da Universidade de Rochester exploraram recentemente uma ferramenta específica para resolver este problema de visibilidade. Eles focaram em uma técnica de coloração que utiliza um marcador proteico chamado p63. No laboratório, os médicos usam corantes especiais para fazer certas células brilharem sob um microscópio, de forma muito semelhante a ligar uma lanterna em um quarto escuro para ver o que há lá. O corante padrão usado para este propósito é conhecido como AE1/AE3, que destaca as proteínas estruturais encontradas nas células da pele. Embora eficaz, este corante padrão tem uma desvantagem: ele também ilumina estruturas da pele saudável, como glândulas sudoríparas e folículos pilosos, muitas vezes de forma muito intensa. Isso pode criar uma poluição visual, tornando mais difícil para o cirurgião distinguir entre o tecido saudável e o câncer. A equipe investigou se a troca para ou a adição da coloração p63 poderia proporcionar uma imagem mais clara, pois sabe-se que este marcador é muito ativo no carcinoma espinocelular, mas menos ativo nas estruturas de pele saudável circundantes.

Para testar essa ideia, a equipe tratou dezesseis pacientes com carcinoma espinocelular pouco diferenciado utilizando esta nova abordagem de coloração durante a cirurgia. Eles aplicaram a coloração p63 às amostras de tecido removidas dos pacientes, às vezes usando-a sozinha e outras vezes junto com o corante padrão AE1/AE3. Os cirurgiões e patologistas então examinaram as lâminas para ver o quão bem cada corante funcionava. Eles procuraram duas coisas: o quão intensamente as células cancerígenas brilhavam e se as estruturas da pele saudável também estavam brilhando, o que causaria confusão. Os resultados mostraram uma diferença distinta entre os dois métodos. O corante padrão AE1/AE3 fez com que as glândulas sudoríparas e os folículos pilosos saudáveis brilhassem intensamente, criando um fundo que poderia distrair do tumor. Em contraste, a coloração p63 deixou essas estruturas saudáveis quase completamente escuras, proporcionando uma visão de alto contraste e limpa das células cancerígenas.

Os dados revelaram que a coloração p63 foi particularmente boa em destacar o câncer. Em quase nove de cada dez casos onde a coloração foi utilizada, as células tumorais apresentaram uma reação forte e clara. Em comparação, o corante padrão destacou as células cancerígenas fortemente em apenas cerca de seis de cada dez casos. Em três instâncias específicas, o corante padrão falhou em mostrar as células tumorais, enquanto a coloração p63 as tornou claramente visíveis. Isso sugere que confiar apenas no método antigo pode ocasionalmente deixar o câncer para trás porque ele simplesmente não consegue ser visto. Os pesquisadores também observaram que, em um caso, o corante padrão destacou fragmentos de queratina, uma proteína da pele, que não faziam parte de um tumor, o que poderia ter sido confundido com câncer. A coloração p63 evitou essa confusão inteiramente.

O estudo acompanhou esses pacientes por uma média de doze meses para observar como eles se saíram após a cirurgia. Durante esse período, dois pacientes apresentaram o retorno do câncer no local original e dois pacientes faleceram. No entanto, os pesquisadores confirmaram que as mortes foram causadas por motivos não relacionados ao câncer de pele. As duas recorrências ocorreram em casos onde ambos os corantes foram utilizados, indicando que, embora a nova coloração melhore a visibilidade, ela não é uma garantia contra todos os problemas futuros. Os autores concluem que o uso da coloração p63 durante a cirurgia oferece uma vantagem significativa ao fazer o câncer se destacar mais claramente contra o tecido saudável. Ela não substitui o método padrão, mas funciona melhor quando usada em conjunto, ajudando os cirurgiões a identificar tumores difíceis de visualizar que poderiam passar despercebidos. Embora mais pesquisas com grupos maiores de pacientes sejam necessárias para confirmar essas descobertas, esta abordagem mostra grande potencial para melhorar a precisão da remoção do câncer de pele.