Using p63 Immunohistochemistry during Mohs micrographic surgery for cutaneous squamous cell carcinoma
本病例系列研究表明，在针对皮肤鳞状细胞癌进行的莫氏显微手术中，将术中 p63 免疫组化与 AE1/AE3 染色结合使用具有显著优势，因为它能在提供强效肿瘤细胞可视化的同时，最大限度地减少仅使用 AE1/AE3 时所见的皮肤附属器干扰性背景染色。
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皮肤癌是现代医学面临的常见挑战，其中最严重的类型之一是皮肤鳞状细胞癌。这种癌症起源于构成皮肤外层的扁平细胞。虽然许多病例的处理过程较为直接，但有些病例具有侵略性且缺乏清晰的边界，导致难以完全切除。为了解决这一问题，外科医生经常使用一种名为莫氏显微外科手术（Mohs micrographic surgery）的专门技术。这种方法涉及逐层移除癌症组织，并立即在显微镜下检查每一块组织，以确保没有残留癌细胞。其目标是在保证肿瘤被彻底清除的同时，尽可能保留更多的健康组织。然而，当癌细胞分化程度较低时——即它们看起来与正常皮肤细胞非常不同且缺乏特征时——它们在标准的显微镜检查中几乎是肉眼不可见的。这就是新工具变得至关重要的时刻，它们提供了一种能够让“隐形”变得可见的方法，并能以更高的精准度引导外科医生的手。
罗切斯特大学的研究人员最近探索了一种特定的工具来解决这个可见性问题。他们专注于一种使用名为 p63 蛋白质标记物的染色技术。在实验室中，医生使用特殊的染料使某些细胞在显微镜下“亮起来”，就像在黑暗的房间里打开手电筒以看清其中的物体一样。用于此目的的标准染料被称为 AE1/AE3，它能突出显示皮肤细胞中的结构蛋白。虽然这种染料很有效，但它也有一个缺点：它也会非常明亮地照亮健康的皮肤结构，例如汗腺和毛囊。这会产生视觉干扰，使外科医生更难区分健康组织与癌症。研究团队调查了切换到 p63 染色或添加 p63 染色是否能提供更清晰的图像，因为已知这种标记物在鳞状细胞癌中非常活跃，但在周围健康的皮肤结构中活跃度较低。
为了测试这个想法，研究小组在对十六名患有分化不良型鳞状细胞癌的患者进行手术期间，采用了这种新的染色方法。他们将 p63 染色应用于从患者身上取出的组织样本，有时单独使用，有时则与标准的 AE1/AE3 染料配合使用。随后，外科医生和病理学家检查了切片，以观察每种染色剂的效果如何。他们寻找两个方面：癌细胞亮起的程度，以及健康的皮肤结构是否也会亮起从而导致混淆。结果显示，两种方法之间存在明显的差异。标准的 AE1/AE3 染色会导致健康的汗腺和毛囊发出强烈的光芒，形成一个可能分散注意力的背景。相比之下，p63 染色使这些健康的结构几乎完全处于黑暗状态，从而为癌细胞提供了一个高对比度的清晰视野。
数据表明，p63 染色在突出显示癌症方面表现尤为出色。在使用了该染料的近十分之九的案例中，肿瘤细胞都显示出强烈且清晰的反应。相比之下，标准染料仅在约十分之六的案例中强烈显示出癌细胞。在三个特定实例中，标准染料完全未能显示出肿瘤细胞，而 p63 染色则使它们清晰可见。这表明，仅仅依赖旧的方法偶尔可能会留下癌症，因为它根本无法被看见。研究人员还注意到，在一个案例中，标准染料突出了角蛋白（一种皮肤蛋白）的碎片，而这部分并不是肿瘤的一部分，这可能会引起误判。p63 染色则完全避免了这种混淆。
该研究对这些患者进行了平均十二个月的随访，以观察他们的术后情况。在此期间，有两名患者在原发部位出现了癌症复发，另有两名患者去世。然而，研究人员确认，死亡原因是与皮肤癌无关的其他因素。两例复发发生在同时使用了两种染色剂的案例中，这表明虽然新染色剂提高了可见性，但它并不能保证免受所有未来问题的困扰。作者得出结论，在手术中使用 p63 染色通过让癌症在健康组织中脱颖而出，提供了显著的优势。它并不取代标准方法，而是通过结合使用效果更好，有助于外科医生识别那些可能被漏掉的、难以观察到的肿瘤。虽然仍需要对更大规模的患者群体进行更多研究以证实这些发现，但这种方法在提高皮肤癌切除准确性方面展现出了巨大的潜力。
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